本文選題：酵母雙雜交 + NP蛋白　； 參考：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：流感病毒的核衣殼蛋白(NP)是病毒粒子中重要的結(jié)構(gòu)蛋白,參與流感病毒生命周期的多個(gè)過(guò)程。為篩選與流感病毒NP相互作用的宿主蛋白,本研究應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)(Y2H)技術(shù)從A549細(xì)胞cDNA文庫(kù)中篩選到與其相互作用的宿主蛋白Tribble 2(TRIB2),并通過(guò)免疫共沉淀技術(shù)(Co-IP)試驗(yàn)和GST pull down試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)NP與TRIB2之間存在特異性的直接相互作用。此外,利用激光共聚焦試驗(yàn)證實(shí)NP與TRIB2共定位于A549細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。在A549細(xì)胞中過(guò)表達(dá)TRIB2蛋白后,能夠降低流感病毒的滴度,表明TRIB2具有抑制流感病毒的復(fù)制功能。本實(shí)驗(yàn)為研究流感病毒的復(fù)制機(jī)理奠定了基礎(chǔ),完善了病毒與宿主相互作用網(wǎng)絡(luò)。
[Abstract]:Nucleocapsid protein (NPP) of influenza virus is an important structural protein in virus particles, which is involved in many processes of influenza virus life cycle. To screen host proteins interacting with influenza virus NP, In this study, yeast two-hybrid technique (Y2H) was used to screen the host protein Tribble _ 2 / Trib _ 2 from the cDNA library of A549 cell line, and to further confirm the existence of NP and TRIB2 by co-IP) and GST pull down tests. Specific direct interaction. In addition, laser confocal assay confirmed that NP and TRIB2 co-located in the cytoplasm of A549 cells. Overexpression of TRIB2 protein in A549 cells can reduce the titer of influenza virus, indicating that TRIB2 can inhibit the replication of influenza virus. This study laid a foundation for studying the replication mechanism of influenza virus and improved the interaction network between virus and host.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)部動(dòng)物流感重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31472215、31521005)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1937149