本文選題：雞 + MHC��； 參考：《揚州大學》2015年碩士論文

【摘要】：我國是養(yǎng)禽大國且養(yǎng)禽產(chǎn)業(yè)發(fā)展非常迅速,而疾病是限制養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的一個重要因素。長時間以來,養(yǎng)禽業(yè)控制疾病主要依賴疫苗免疫,由于MDV等病毒的普遍存在及病毒毒力的不斷增強等許多原因,使得免疫雞群甚至是免疫過疫苗的雞群仍時有感染。因此,研究者開始轉(zhuǎn)向雞的抗病育種研究,期望能在遺傳素質(zhì)上提高雞只的抗病性。許多研究已經(jīng)表明,MHC基因的多態(tài)性在家禽中與多種傳染病的抗性存在高度相關性,是家禽抗病育種研究中的優(yōu)選標記基因。在雞上,已發(fā)現(xiàn)某些MHC單倍型與抗病性、免疫應答及經(jīng)濟性狀間具有相關性,但對其研究還遠遠落后于人類,分析出不同雞種的血型單倍型關系并對那些具有抗性的雞種進行選育,具有重要的經(jīng)濟意義。本研究以26個中國地方雞種和外來雞種為研究對象,根據(jù)MHC基因上LEI0258微衛(wèi)星座位的序列信息,對這些雞種進行MHC單倍型的判定,并在新?lián)P州雞群體內(nèi)制備了B21和B18兩種同種免疫抗血清,并在不同雞群中用血清學方法對抗血清進行了驗證。首先,為了確定不同雞種的MHC單倍型,我們選取26個雞種,每個雞種按照10個個體混成一個DNA池的標準送入華大基因公司(BGI)對MHC基因進行目標捕獲測序,找出不同雞種MHC基因序列上的差異,發(fā)現(xiàn)在BLB2、BMA2、B-NKNK、LOC100858749、TAP2基因上外來雞種與地方雞種存在較大差異,這些基因可以作為以后抗病研究的候選基因。根據(jù)MHC基因上LEI0258微衛(wèi)星重復序列片段數(shù)目的不同以及圍繞重復序列的側(cè)翼序列的多態(tài)性,對不同雞種進行MHC單倍型的判定,并根據(jù)文獻資料,對不同血型單倍型與疾病抗性的關系進行統(tǒng)計分析。結(jié)果表明：LE10258微衛(wèi)星座位序列多態(tài)性豐富,不同雞種在LE10258微衛(wèi)星座位上也存在著位點差異性,26個雞種分為以下不同單倍型：烏骨雞為B18單倍型；來航雞為B5單倍型；溧陽雞為B10/B24/B26/B76單倍型；廣西黃雞與白耳雞為B72/B78單倍型；羅斯雞、固始雞、雪山草雞、蕭山雞、隱性白羽雞、鹿苑雞、太湖雞和綠殼蛋雞都為B21.1/BQ/BW1單倍型；安卡雞、大骨雞、文昌雞及青腳麻雞為BC單倍型；斗雞、紅色原雞、仙居雞、狼山雞、如草雞、北京油雞和AA雞為BC/B21.1/BQ/BW1單倍型；藏雞與茶花雞出現(xiàn)了新的單倍型。由于MHC血型單倍型與疾病抗性存在密切關系,根據(jù)文獻報道及測得不同雞種的MHC單倍型,結(jié)果顯示：烏骨雞為B18單倍型對SE顯示為易感性；來航雞為B5單倍型對MD、RSV、ALV以及IBD顯示出易感性；羅斯雞、固始雞、雪山草雞、蕭山雞、隱性白羽雞、鹿苑雞、太湖雞、綠殼蛋、斗雞、紅色原雞、仙居雞、狼山雞、如草雞、北京油雞和AA雞都含B21單倍型,對MD、AL以及IBD顯示出較強的抗性,這些雞種對不同疾病顯示出不同的抗性。這些結(jié)果表明我國地方雞種中MHC單倍型種類比較豐富,遺傳多樣性較高,這可能是地方雞種比外來雞種及現(xiàn)代商業(yè)品種抗性強的主要原因之一。由于血型是可以遺傳的,通過紅細胞凝集實驗利用特異性抗血清可以快速鑒定出不同雞種的血型,這種方法簡便快捷,有廣泛的使用價值。我們選定新?lián)P州雞對LEI0258微衛(wèi)星片段進行擴增并進行重測序分析,找出含有B21和B18單倍型的雞只,并以它們的外周血紅細胞作為免疫原,對其它單倍型雞進行免疫,制備了同種異型抗血清,建立了微量血凝試驗,對抗血清效價進行了測定并在新?lián)P州雞和羅斯雞群體內(nèi)用血清學方法進行了驗證。結(jié)果表明：新?lián)P州雞群體內(nèi)存在不同單倍型,同單倍型不同個體雞的效價大致相同,B21抗血清血和B18抗血清凝效價均為1：4。利用血清學鑒定手段在新?lián)P州雞和羅斯雞群體內(nèi)檢測兩種抗血清效果,結(jié)果顯示新?lián)P州雞群體內(nèi)B21單倍型個體比例較高,羅斯雞群體內(nèi)B18單倍型個體比例較高,此結(jié)果也進一步說明中國地方雞種抗性優(yōu)于商業(yè)品種。利用克隆測序?qū)x取的新?lián)P州雞和羅斯雞進行驗證,序列信息結(jié)果與血凝結(jié)果呈現(xiàn)一致性。本研究結(jié)果為雞的血型鑒定提供了物質(zhì)基礎,也為抗病育種研究提供基礎材料。
[Abstract]:On the basis of the sequence information of LEI0258 microsatellite loci on the MHC gene , we have found that the polymorphism of the MHC gene is highly correlated with disease resistance , immune response and economic traits .
The chick is B5 haplotype ;
B26 / B76 haplotype of Liyang chicken is B26 / B76 ;
B72 / B78 haplotype was found in yellow chicken and white - ear chicken in Guangxi ;
Rose chicken , Gushi chicken , snow mountain grass chicken , Xiao Shan chicken , recessive white feather chicken , deer park chicken , Taihu chicken and green shell layer chicken are B21 . 1 / BQ / BW1 haplotype ;
The BC haplotype of Anka chicken , big bone chicken , amphioxus chicken and blue - foot hemp chicken were used as BC haplotype ;
cockfighting cock , red raw chicken , Xianju chicken , Langshan chicken , such as grass chicken , Beijing oil chicken and AA chicken are BC / B21 . 1 / BQ / BW1 haplotype ;
There was a new haplotype between Tibetan chicken and tea flower . Because of the close relationship between MHC haplotype and disease resistance , the MHC haplotype of different chicken species was reported and measured according to the literature .
It showed susceptibility to MD , RSV , ALV and IBD .
The results showed that B21 and B18 haplotype were more resistant to different diseases . The results showed that B21 and B18 haplotype were more resistant to different diseases . The results showed that B21 and B18 haplotype were more resistant to different diseases .
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S831

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本文編號：1912494