本文選題：雞傳染性支氣管炎病毒 + M基因　； 參考：《中國(guó)家禽》2017年15期

【摘要】：采用RT-PCR擴(kuò)增雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)廣西優(yōu)勢(shì)血清型代表性毒株GX-YL5的膜(M)蛋白基因,將其克隆至pFastBac~(TM)/HBM-TOPO桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞,獲得重組桿粒rHBM-M;將重組桿粒轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲細(xì)胞,獲得重組桿狀病毒;利用間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)和蛋白質(zhì)免疫印跡(Western-blot)鑒定表達(dá)的M蛋白。IFA檢測(cè)可見(jiàn)重組桿狀病毒感染后72h細(xì)胞出現(xiàn)特異性熒光,Westernblot檢測(cè)可見(jiàn)大小約為26ku的特異性蛋白帶,表明該重組M蛋白在Sf9昆蟲細(xì)胞中成功獲得表達(dá)。研究為IBVM蛋白的生物學(xué)功能、IBV診斷試劑和新型疫苗制備等奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:RT-PCR was used to amplify the protein gene of the dominant serotype representative strain GX-YL5 of Guangxi, and then cloned it into the transfer vector of pFastBac~(TM)/HBM-TOPO baculovirus, and transformed into E. coli DH10Bac receptive cells. Recombinant rHBM-Mand recombinant baculovirus was obtained by transfection of rHBM-Mand into Sf9 insect cells. The expressed M protein was identified by indirect immunofluorescence assay (IFA) and Western blot (Western blot). Specific fluorescent and Western blot analysis showed that the specific protein band of 26ku could be found in the cells 72 hours after the infection of recombinant baculovirus. The results showed that the recombinant M protein was successfully expressed in Sf9 insect cells. The study laid a foundation for the biological function of IBVM protein and the preparation of new vaccine.
【作者單位】： 廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360611) 廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014GXNSFDA118011、2013GXNSFCA019010)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1900534