本文選題：犬鉤端螺旋體病 + 診斷��； 參考：《吉林大學》2015年碩士論文

【摘要】：鉤端螺旋體病（簡稱鉤體�。�，是因感染具有致病性的鉤體所引起的一種人獸共患病。犬鉤端螺旋體病，是由常見對犬致病的犬型、黃疸出血型、塔拉索夫型等鉤體所引起。犬對該病具有易感性，犬感染本病后，臨床表現(xiàn)多樣，不易進行診斷，因此需要實驗室檢測對本病進行輔助的鑒別診斷。常見實驗室診斷方法有直接鏡檢，分離培養(yǎng)，血清學檢測，動物接種等，但這些方法或不具備時效性，或缺乏準確性。相較于這些方法，聚合酶鏈反應（PCR）方法更省時省力，特異性和敏感性優(yōu)異，并且可用于鉤體病的早期診斷。 本實驗依據(jù)僅致病性鉤端螺旋體含有的LigB基因序列的保守片段，并對常見對犬致病的鉤體株的相關序列進行比對，設計了數(shù)對特異性的引物和探針，目的片段大小為124bp。對探針和引物進行篩選及反應條件與體系的優(yōu)化，構建了含目的基因的質粒作為標準陽性對照，，并對質粒進行測序驗證。建立了犬鉤端螺旋體病PCR和熒光定量PCR診斷方法，并組裝成可實現(xiàn)對犬鉤體病進行快速高效診斷的試劑盒。對試劑盒的靈敏度、特異性、重復性等參數(shù)進行了檢驗，確定其保存條件和保存期,采集并檢測臨床犬血液和尿液樣本，與顯微凝集試驗相比較，結果一致。 近年來，寵物犬的數(shù)量不斷增加，各類工作犬的數(shù)量也有上升。犬易感鉤體病，影響犬自身及其主人的健康，該檢測方法可推廣應用于犬鉤體病的早期檢測，避免該病的進一步發(fā)展和擴散。 鉤端螺旋體的培養(yǎng)需要數(shù)周的時間，培養(yǎng)基的配制程序復雜，而診斷鉤體病的金標準方法MAT，需要活體鉤體才能進行診斷，因而很難得到推廣和應用，而PCR方法不需要進行鉤體的培養(yǎng)，并且相比于血清學方法，還可用于鉤體病的早期診斷。在該實驗中，建立的普通PCR方法檢測鉤體濃度的靈敏度可達到101，熒光定量PCR方法的靈敏度可達100。
[Abstract]:The leptospirosis is a kind of zoonotic disease caused by the leptospirosis caused by infection . The canine leptospirosis is caused by the common dog type , jaundice , blood type and Tarasov type . The dog has a susceptibility to the disease . The dog has a variety of clinical manifestations and is not easy to diagnose . The common laboratory diagnosis method has direct microscopic examination , separation culture , serological detection , animal vaccination , etc . The method has the advantages of saving time and effort , specificity and sensitivity , and can be used for early diagnosis of leptospirosis .

The PCR and fluorescence quantitative PCR diagnosis of leptospirosis in dogs was established . The PCR and fluorescence quantitative PCR methods were used to test the sensitivity , specificity and repeatability of the kit . The blood and urine samples were collected and tested . The results were consistent with the microscopic agglutination test .

In recent years , the number of pet dogs has increased , and the number of various kinds of working dogs has also increased . The dog is susceptible to leptospirosis and affects the health of the dog itself and its owner . The detection method can be popularized and applied to the early detection of dog leptospirosis , so as to avoid further development and diffusion of the disease .

The culture of leptospirosis requires several weeks , the preparation procedure of the culture medium is complex , and the gold standard method MAT for diagnosing leptospirosis needs a living hook body for diagnosis , so it is difficult to be popularized and applied , and the PCR method does not need to carry out early diagnosis of leptospirosis compared with serological method .

【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.292

【參考文獻】

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本文編號：1867594