本文選題：乙腦病毒 + EDⅢ結(jié)構(gòu)域　； 參考：《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年12期

【摘要】：為了分析和驗(yàn)證作為乙腦病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)亞單位疫苗研制的主要候選抗原EDⅢ結(jié)構(gòu)域的免疫原性及其所產(chǎn)生的抗體對(duì)病毒的抑制效果,本研究利用RT-PCR方法擴(kuò)增基因Ⅰ型JEV GS株EDⅢ結(jié)構(gòu)域基因,構(gòu)建原核重組表達(dá)載體p ET-30a-EDⅢ,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞,挑取陽(yáng)性克隆進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)和純化;將純化的EDⅢ重組蛋白免疫家兔以制備多克隆抗體,利用Western-blot和間接免疫熒光試驗(yàn)驗(yàn)證制備的家兔抗EDⅢ多克隆抗體與全病毒抗原的特異性反應(yīng),并通過(guò)噬斑減少中和試驗(yàn)(PRNT50)測(cè)定家兔抗EDⅢ多克隆抗體的中和抗體效價(jià)。結(jié)果表明,重組EDⅢ蛋白以包涵體的形式表達(dá),并獲得了較高純度的EDⅢ重組蛋白,制備的家兔抗EDⅢ多克隆抗體與全病毒抗原具有良好的特異性反應(yīng),中和抗體效價(jià)為133±46.2。以上結(jié)果表明,基因Ⅰ型JEV GS株EDⅢ結(jié)構(gòu)域具有良好的免疫原性,免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗體具有較高的中和抗體效價(jià),EDⅢ結(jié)構(gòu)域可作為JEV亞單位疫苗研制的候選抗原。
[Abstract]:In order to analyze and verify the immunogenicity of the main candidate antigen Ed 鈪，

本文編號(hào)：1856582