本文選題：雞 + 卵巢�。� 參考：《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：禽類卵巢卵泡的發(fā)育是一個(gè)復(fù)雜且精細(xì)的過(guò)程,不斷經(jīng)歷著卵泡的生長(zhǎng)、優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇和卵泡分化等一系列重要環(huán)節(jié)。另外,卵巢卵泡的發(fā)育又受到內(nèi)分泌、自分泌、旁分泌等多種方式的調(diào)節(jié)。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中,研究禽類卵巢以及卵泡發(fā)育調(diào)控的機(jī)制對(duì)于有效地開(kāi)發(fā)利用卵巢內(nèi)的卵泡資源,提高家禽的繁殖性能,改善蛋禽的產(chǎn)蛋性能,提高生產(chǎn)效率具有重要意義。在卵泡生長(zhǎng)過(guò)程中,雌激素是一種關(guān)鍵的卵泡內(nèi)調(diào)節(jié)分子,是由顆粒細(xì)胞和卵泡內(nèi)膜細(xì)胞合成的類固醇類激素的一種,具有加快卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞的增殖、增強(qiáng)FSH與黃體生成素LH對(duì)卵巢細(xì)胞的增殖與分化產(chǎn)生效應(yīng)的作用,另外雌激素也可以調(diào)節(jié)卵泡的等級(jí)發(fā)育�？傊�,雌激素在動(dòng)物繁殖發(fā)育的過(guò)程中起著非常重要的作用,而大多數(shù)的雌激素是通過(guò)兩種不同的核內(nèi)雌激素受體ERα與ERβ來(lái)發(fā)揮作用的。ERα與ERβ是主要的依賴配體活化轉(zhuǎn)錄因子的蛋白超家族成員,通過(guò)參與轉(zhuǎn)錄過(guò)程調(diào)控靶細(xì)胞的增殖和分化。目前,ERα與ERβ基因mRNA在雞不同等級(jí)卵泡中的表達(dá)情況已有部分研究,但是在不同時(shí)期雞卵巢與卵泡中ERα與ERβ基因mRNA和蛋白的表達(dá)及定位情況尚未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。為了進(jìn)一步了解ERα與ERβ在雞卵泡發(fā)育過(guò)程中的潛在作用,運(yùn)用q RT-PCR和Western blotting技術(shù)分別檢測(cè)了45、60、90、110、120與160天雞卵巢與卵泡中ERα與ERβmRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示ERα基因mRNA呈現(xiàn)V樣表達(dá)模式,從45天到90天逐漸降低,并且在90天時(shí)最低,從90天到160天逐漸增加。而且45、160天時(shí)ERαmRNA顯著高于90天,蛋白表達(dá)與mRNA表達(dá)趨勢(shì)基本一致。免疫組化分析揭示了45天雞卵巢中ERα主要富集于卵巢初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞層和卵母細(xì)胞,在細(xì)胞膜和細(xì)胞間質(zhì)有少量表達(dá),而且發(fā)現(xiàn)在卵巢髓質(zhì)層的血管中有一定量表達(dá)證明ERα在血管形成中起作用。在各級(jí)卵泡中ERαmRNA和蛋白在SY卵泡中表達(dá)最高,而在SY、F5、F3、F1各級(jí)卵泡中呈現(xiàn)逐級(jí)遞減趨勢(shì),免疫組化結(jié)果顯示ERα蛋白主要分布在顆粒細(xì)胞層,而且SW、SY卵泡中表達(dá)相對(duì)較高,在F5、F3、F1中表達(dá)相對(duì)較低。這結(jié)果暗示,在發(fā)育過(guò)程中雌激素很可能是通過(guò)自分泌/旁分泌形式與ERα結(jié)合進(jìn)行卵巢卵泡功能的調(diào)控。而ERβmRNA呈現(xiàn)L樣表達(dá)模式,在45天表達(dá)量最高,60天到90天急速下降,90天之后表達(dá)較低并趨于穩(wěn)定,蛋白表達(dá)呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)。研究顯示ERβmRNA和蛋白在SW到F1的各級(jí)卵泡中逐漸降低。結(jié)果表明不同時(shí)期雞卵巢及各級(jí)卵泡中ERα與ERβ基因表達(dá)存在明顯的不同。這暗示兩類受體對(duì)蛋雞卵巢與卵泡的發(fā)育具有不同的作用,具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:The development of poultry ovarian follicles is a complex and fine process, which constantly experiences a series of important steps, such as follicular growth, selection of dominant follicles and follicular differentiation. In addition, ovarian follicle development by endocrine, autocrine, paracrine and other ways of regulation. In animal husbandry, it is of great significance to study the mechanism of ovaries and follicle development regulation in poultry for the effective development and utilization of follicular resources in ovaries, the improvement of poultry reproductive performance, the improvement of egg laying performance, and the improvement of production efficiency. During follicular growth, estrogen is a key regulatory molecule in the follicle, a steroid hormone synthesized by granulosa cells and endometrial cells of the follicle, which accelerates the proliferation of granulosa cells in the follicle. The effects of FSH and luteinizing hormone LH on the proliferation and differentiation of ovarian cells were enhanced. In addition, estrogen could also regulate the grade development of follicles. In short, estrogen plays a very important role in animal reproduction and development. The majority of estrogen is mediated by two different nuclear estrogen receptors, ER 偽 and ER 尾. ER 偽 and ER 尾 are major ligand-activated transcription factor dependent protein superfamily members. The proliferation and differentiation of target cells are regulated by participating in the transcription process. At present, the expression of ER 偽 and ER 尾 gene mRNA in different grade follicles has been partly studied, but the expression and localization of ER 偽 and ER 尾 gene mRNA and protein in different stages of chicken ovary and follicle have not been reported. In order to further understand the potential role of ER 偽 and ER 尾 in the development of chicken follicles, the expression of ER 偽 and ER 尾 mRNA and protein in the ovary and follicles were detected by Q RT-PCR and Western blotting techniques respectively. The results showed that the expression pattern of ER 偽 gene mRNA was V-like, which decreased gradually from 45 days to 90 days, and increased gradually from 90 days to 160 days after 90 days. The expression of ER 偽 mRNA was significantly higher than that of 90 days at day 45160, and the expression of ER 偽 mRNA was consistent with the trend of mRNA expression. Immunohistochemical analysis revealed that ER 偽 was mainly concentrated in granulosa cell layer and oocyte of primary follicle of ovary at 45 days, and expressed a little in cell membrane and stroma. It was also found that ER 偽 plays an important role in angiogenesis in the medullary layer of ovary. The expression of ER 偽 mRNA and protein was the highest in sy follicles, but decreased gradually in SYF5F3F3F 1 follicles. The immunohistochemical results showed that ER 偽 protein was mainly distributed in granulosa layer, and the expression of ER 偽 protein was relatively high in SWSY follicles. The expression was relatively low in F _ 5, F _ 3, F _ 1. These results suggest that estrogen may regulate ovarian follicle function through the combination of ER 偽 and autocrine / paracrine during development. On the other hand, the expression of ER 尾 mRNA showed L-like expression pattern. The expression of ER 尾 mRNA decreased rapidly from 60 days to 90 days after 45 days. The expression of ER 尾 mRNA tended to be stable, and the expression of protein decreased gradually. The results showed that ER 尾 mRNA and protein decreased gradually in all follicles from SW to F 1. The results showed that ER 偽 and ER 尾 gene expression were significantly different in different stages of chicken ovary and follicles. This suggests that the two receptors have different effects on the development of ovaries and follicles in laying hens, and the specific mechanisms need to be further studied.
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S831

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本文編號(hào)：1856520