本文選題：犬細(xì)小病毒 + 分離��； 參考：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年07期

【摘要】：為了解當(dāng)前犬細(xì)小病毒廣西地方毒株的生物學(xué)特性,本研究收集廣西各地疑似犬細(xì)小病毒(CPV)感染病犬的糞便通過接種F81細(xì)胞進(jìn)行病毒的分離培養(yǎng),并通過血凝試驗(yàn)、抗性分析、同源性分析和攻毒試驗(yàn)等對分離毒株的生物學(xué)特性及致病力進(jìn)行研究。結(jié)果顯示,接種3代后,細(xì)胞出現(xiàn)明顯的病變(CPE),血凝效價(jià)為1∶512,第5代病毒的TCID_(50)為1×10~(-3.6)/0.1 m L,能抗熱、酸、氯仿和乙醚;電鏡觀察到CPV為直徑約25 nm圓形、無囊膜的結(jié)構(gòu),應(yīng)用CPV特異性引物檢測到長約1 419 bp和1 254 bp的特異性條帶,提示成功分離到一株犬細(xì)小病毒毒株;測序分析結(jié)果表明,VP2基因與周邊國家地區(qū)及我國各地方的參考毒株、流行株核苷酸同源性為98.9%~99.8%;系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)生分析表明,廣西分離株的基因型為CPV-2a亞型,與泰國參考毒株VT148親緣關(guān)系最近;與其它CPV-2a亞型相比,分離株的第267位、305位、324位和440位氨基酸位點(diǎn)發(fā)生了變異;動物回歸試驗(yàn)結(jié)果表明,犬細(xì)小病毒廣西分離株屬于強(qiáng)毒株。本研究成功分離到犬細(xì)小病毒廣西地方流行株,并對其主要衣殼蛋白VP2基因進(jìn)行遺傳變異分析,為更好的預(yù)防和控制犬細(xì)小病毒提供依據(jù)。
[Abstract]:In order to understand the biological characteristics of local canine parvovirus strains in Guangxi, the feces of dogs infected by suspected canine parvovirus (CPV) were isolated and cultured by inoculation of F81 cells, and the resistance was analyzed by hemagglutination test. The biological characteristics and pathogenicity of isolated strains were studied by homology analysis and virus attack test. The results showed that after 3 passage inoculation, the cells showed obvious pathological changes, the hemagglutination titer was 1: 512, and the TCIDX 50 of the fifth generation virus was 1 脳 10 ~ (-3.6) / 0.1 mL, which could resist heat, acid, chloroform and ether. The structure of CPV was observed to be about 25 nm in diameter and without capsule membrane. The specific bands of about 1 419 BP and 1 254 BP were detected by using CPV specific primers, indicating that a canine parvovirus strain was successfully isolated, and the sequencing analysis showed that VP2 gene was associated with the reference strains in neighboring countries and regions of China. The nucleotide homology of the epidemic strain was 98.9 and 99.8.The phylogenetic analysis showed that the genotype of Guangxi isolate was CPV-2a subtype, which had the closest relationship with Thailand reference strain VT148, and compared with other CPV-2a subtypes. The amino acid loci at the 34th and 440 amino acid loci were mutated at the 267 and 440 position, and the animal regression test showed that the canine parvovirus isolated from Guangxi was highly virulent. In this study, the local canine parvovirus strains in Guangxi were successfully isolated, and the genetic variation of the main capsid protein VP2 gene was analyzed in order to provide a basis for better prevention and control of canine parvovirus.
【作者單位】： 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣西民族大學(xué)海洋與生物技術(shù)學(xué)院;武鳴縣動物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃重點(diǎn)專項(xiàng)(2016YFD0501000)
【分類號】：S852.655

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本文編號：1797045