瘤胃真菌分離鑒定及酶學(xué)特性
發(fā)布時(shí)間:2018-04-24 09:07
本文選題:瘤胃厭氧真菌 + 細(xì)胞壁降解酶�。� 參考:《農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)》2017年10期
【摘要】:厭氧真菌(Neocallimastigomycota)具有很強(qiáng)的植物組織降解能力,是草食動(dòng)物消化道內(nèi)一類(lèi)重要的降解植物細(xì)胞壁的功能菌。為篩選可提高粗飼料利用率的高植物細(xì)胞壁降解酶活性厭氧真菌,本研究采用亨蓋特厭氧滾管技術(shù)從西農(nóng)薩能奶山羊(Capra hircus)瘤胃中分離獲得12株真菌菌株,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀(guān)察、核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)和28S rDNA D1/D2區(qū)基因序列分析確定其分類(lèi)地位。測(cè)定12株真菌的植物細(xì)胞壁降解酶活性(木聚糖酶,羧甲基纖維素酶,微晶纖維素酶,乙酰酯酶和β-葡聚糖酶),并對(duì)活性最高菌株分泌的木聚糖酶和乙酰酯酶進(jìn)行酶學(xué)特性分析。結(jié)果表明,12株厭氧真菌均鑒定為Piromyces屬,分別命名為Piromyces sp.CN1~Piromyces sp.CN12,ITS基因序列Genbank登錄號(hào)為KY368100~KY368111。其中,Piromyces sp.CN6的木聚糖酶、羧甲基纖維素酶和乙酰酯酶活性分別為1655.3、93.4和152.8 m U,顯著高于其他菌株(P0.05);Piromyces sp.CN3的微晶纖維素酶活性最高,但與Piromyces sp.CN6差異不顯著(P0.05);各菌株間β-葡聚糖酶活性差異不顯著(P0.05)。木聚糖酶與羧甲基纖維素酶、乙酰酯酶存在極顯著正相關(guān)(P0.01),與微晶纖維素酶呈顯著正相關(guān)(P0.05)。酶學(xué)特性表明,Piromyces sp.CN6分泌的木聚糖酶最適反應(yīng)溫度為50℃,最適pH為5.0,該酶在40℃和pH5.0~8.0下較穩(wěn)定;K~+、Ca~(2+)和Co~(2+)對(duì)其有激活作用,Zn~(2+)、Cu~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(2+)和Mn~(2+)抑制該酶活性。乙酰酯酶的最適反應(yīng)溫度為50℃,最適pH為9.0,該酶在40℃和pH 5.0~10.0下較穩(wěn)定;Mg~(2+)、K+、Ca~(2+)對(duì)乙酰酯酶有激活作用,Zn~(2+)、Fe~(2+)、Co~(2+)和Mn~(2+)抑制該酶活性。本研究從奶山羊瘤胃內(nèi)容物篩選獲得的Piromyces sp.CN6具有較高的植物細(xì)胞壁降解酶活性,通過(guò)酶活測(cè)定和酶學(xué)特性分析,豐富和完善瘤胃真菌的酶系信息,為深入應(yīng)用提供依據(jù)。
[Abstract]:The enzyme activity of xylanase , carboxymethyl cellulase , microcrystalline cellulose , acetyl esterase and 尾 - glucanase from the rumen of Capra hircus was studied . The results showed that the activity of xylanase , carboxymethyl cellulose and acetyl esterase of Piromyces sp . CN6 was significantly higher than that of other strains ( P0.05 ) . The optimum pH was 5.0 , the enzyme was stable at 40 鈩,
本文編號(hào):1796014
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