發(fā)布時(shí)間：2018-04-15 23:02

  本文選題：產(chǎn)氣莢膜梭菌 + 毒素型��； 參考：《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年08期

【摘要】：根據(jù)GenBank中已發(fā)布的產(chǎn)氣莢膜梭菌α,β,ε,ι毒素基因序列,設(shè)計(jì)并合成4對(duì)特異性引物,經(jīng)過優(yōu)化多重PCR反應(yīng)條件,建立了檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌不同毒素型多重PCR方法。特異性試驗(yàn)表明,該方法對(duì)A,B,C,D,E型產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株均擴(kuò)增出了相應(yīng)的目的條帶,而對(duì)諾維氏梭菌和腐敗梭菌擴(kuò)增為陰性;靈敏性試驗(yàn)表明,該方法對(duì)A,B,C,D,E型標(biāo)準(zhǔn)菌株基因組DNA最低檢測(cè)量分別為9.0,17.8,12.2,13.8,18.5pg;重復(fù)性試驗(yàn)表明,該方法有很好的重復(fù)性。應(yīng)用所建立的方法從21份羊臨床病料中檢測(cè)出9株A型和1株C型產(chǎn)氣莢膜梭菌。本試驗(yàn)建立的多重PCR方法可以進(jìn)行產(chǎn)氣莢膜梭菌的快速檢測(cè)及5種毒素型的鑒別。
[Abstract]:According to the sequence of 偽, 尾, 蔚, l toxin genes of Clostridium perfringens published in GenBank, four pairs of specific primers were designed and synthesized. After optimizing the reaction conditions of multiple PCR, a method for detecting different types of multiple PCR of Clostridium perfringens was established.The specificity test showed that the target bands were amplified by this method for the standard strains of Clostridium perfringens, but negative for Clostridium norvegris and Clostridium putrefaciens, and the sensitivity test showed that,The minimum detection of genomic DNA for the standard strain of Ampelopsis Candrosemide E was 9.0 ~ 17.812.813.8 ~ 18.5pg. the reproducibility test showed that the method had good reproducibility, and the results showed that the method had good reproducibility and reproducibility, and the results showed that the method had good reproducibility and reproducibility.Nine isolates of Clostridium perfringens type A and one strain of type C were detected from 21 sheep clinical samples by using the established method.The multiplex PCR method established in this study can be used for rapid detection of Clostridium perfringens and identification of five toxin types.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】：陜西省科技攻關(guān)資助項(xiàng)目(2015NY162) 西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)示范站(基地)科技成果推廣資助項(xiàng)目(TGZX2015-32)
【分類號(hào)】：S852.61

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8 劉家森;兔產(chǎn)氣莢膜梭菌（A型）α毒素原核表達(dá)產(chǎn)物免疫原性分析[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

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10 田冬青;產(chǎn)氣莢膜梭菌的多重PCR定型及α、β和ε毒素基因的克隆、表達(dá)和抗血清的制備[D];中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;2007年

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本文編號(hào)：1756183