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Tβ10基因過表達對離體鹿茸干細胞增殖、衰老和遷移的影響

發(fā)布時間:2018-04-13 14:26

  本文選題:鹿 + 胸腺素β(Tβ); 參考:《農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報》2017年01期


【摘要】:胸腺素β10(thymosin beta 10,Tβ10)基因是腫瘤發(fā)生以及惡化分級的一個預(yù)判指標。研究發(fā)現(xiàn),鹿(Cervidae)茸頂端的生長中心組織中Tβ10高度表達,而鹿茸卻能快速生長(2 cm/d)不發(fā)生任何癌變。為了研究內(nèi)源性鹿Tβ10基因過表達對鹿茸干細胞部分生物學(xué)特性的影響。本研究通過采集鹿生茸區(qū)骨膜(antlerogenic periosteum,AP)組織并對其進行了原代培養(yǎng)獲得了高純度AP細胞。通過克隆鹿Tβ10基因并構(gòu)建慢病毒過表達載體,離體包裝并收集慢病毒顆粒后感染AP細胞,q RT-PCR檢測表明Tβ10基因表達量相對于對照上調(diào)了2.5倍,進而建立Tβ10過表達AP細胞系。四甲基偶氮唑鹽比色法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT)實驗表明,Tβ10基因過表達能極顯著抑制AP細胞增殖(P0.01);β-半乳糖苷酶染色顯示,Tβ10基因過表達極顯著地促進了AP細胞的衰老(P0.01);細胞劃痕實驗表明,Tβ10基因過表達顯著抑制人(Homo sapiens)臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的細胞遷移(P0.05)。本研究為揭示鹿茸快速生長機制而不發(fā)生癌變以及深入研究鹿Tβ10基因在鹿茸快速生長中的功能提供了理論依據(jù)。
[Abstract]:Thymosin 尾 10(thymosin beta 10 T 尾 10) gene is a predictor of tumor progression and progression.It was found that T 尾 10 was highly expressed in the growth center of Cervidae antler tip, while the antler could grow at a rate of 2 cm / d) without any carcinogenesis.To study the effect of overexpression of endogenous deer T 尾 10 gene on some biological characteristics of pilose antler stem cells.In this study, high purity AP cells were obtained by collecting and primary culture the tissue of antlerogenic periosteum.By cloning deer T 尾 10 gene and constructing lentivirus overexpression vector, the Q RT-PCR analysis of AP cells infected with lentivirus particles in vitro showed that T 尾 10 gene expression increased 2.5 times compared with control, and then T 尾 10 overexpression AP cell line was established.The results of methyl thiazolyl tetrazolium assay-MTT assay showed that the overexpression of T 尾 10 gene could significantly inhibit the proliferation of AP cells (P 0.01); 尾 -galactosidase staining showed that the overexpression of T 尾 10 gene significantly promoted the aging of AP cells (P 0.01);The results showed that the overexpression of T 尾 10 gene significantly inhibited the migration of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) from human umbilical vein endothelial cells.This study provides a theoretical basis for revealing the mechanism of rapid growth of velvet antler without carcinogenesis and for further studying the function of deer T 尾 10 gene in rapid growth of velvet antler.
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所/特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)國家重點實驗/吉林省鹿茸工程研究中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.31500792) 吉林省科技發(fā)展計劃項目(No.20140101139JC) 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程項目(No.CAAS-ASTIP-2014-ISAPS-04)
【分類號】:S825

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