本文選題：傳染性支氣管炎病毒(IBV)　切入點：刺突蛋白(S)　出處：《病毒學(xué)報》2017年05期

【摘要】：雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)在體外進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)比較困難,并且不同來源毒株在易感性上也存在差異。為揭示IBV適應(yīng)CK細(xì)胞培養(yǎng)的分子基礎(chǔ),優(yōu)化其細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),本研究首先對H120疫苗株和IBYZ分離株的分子克隆株rH120和rIBYZ,在雞胚、雞氣管環(huán)以及原代雞腎細(xì)胞(CK)上培養(yǎng)時組織細(xì)胞的嗜性差異進(jìn)行了比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)rIBYZ與rH120在CK上的親嗜性存在顯著差異。在此基礎(chǔ)之上,課題組借助前期建立的IBV反向遺傳操作系統(tǒng),將H120疫苗株和IBYZ株的S基因進(jìn)行交叉替換,成功拯救獲得2株重組病毒rH120-S/YZ和rIBYZ-S/H120。通過比較不同毒株感染CK細(xì)胞后的病變、特異性免疫熒光的強(qiáng)度以及病毒的增殖曲線,表明刺突蛋白(S)在IBV適應(yīng)CK細(xì)胞過程中發(fā)揮決定性作用。本文揭示了S蛋白對細(xì)胞嗜性的影響,為進(jìn)一步探索IBV適應(yīng)細(xì)胞的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Chicken infectious bronchitis virus (IBV) was difficult to culture in vitro, and the susceptibility of different strains was different.In order to reveal the molecular basis of IBV adapting to CK cell culture and to optimize its cell culture technique, the molecular clones rH120 and rIBYZ of H120 vaccine and IBYZ isolate were first studied in chicken embryo.The difference of tissue cell tropism between rIBYZ and rH120 on CK was found to be significantly different from that of rH120 in the culture of chicken trachea ring and primary chicken kidney cell (CK). The results showed that there was a significant difference in the cytotropism between rIBYZ and rH120 on CK.On the basis of the above, the S gene of H120 vaccine strain and IBYZ strain were cross-replaced by the IBV reverse genetic operating system, and two recombinant viruses, rH120-S/YZ and rIBYZ-Sr H120, were successfully saved.By comparing the pathological changes, the intensity of specific immunofluorescence and the curve of virus proliferation of CK cells infected with different virulent strains, it is concluded that Sus) plays a decisive role in the adaptation of IBV to CK cells.In this paper, the effect of S protein on cell eosinophilia was revealed, which laid a foundation for further exploring the molecular mechanism of IBV adaptation to cells.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(項目號:31602091),題目:S蛋白介導(dǎo)的雞傳染性支氣管炎病毒適應(yīng)CK細(xì)胞的分子基礎(chǔ)研究;國家自然科學(xué)基金面上項目(項目號:31572524),題目:傳染性支氣管炎病毒胚化致弱株毒力減弱的分子機(jī)制研究 江蘇省科技支撐計劃(項目號:BE2012369),題目:雞傳染性支氣管炎基因重組減毒活疫苗的研制 揚(yáng)州市自然科學(xué)基金(項目號:YZ2014029),題目:嵌合流行株S基因重組雞傳染性支氣管炎病毒疫苗候選株的構(gòu)建及其免疫原性研究~~
【分類號】：S852.65

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本文編號：1721331