山羊痘病毒PCR檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用
本文選題:山羊痘 切入點(diǎn):聚合酶鏈反應(yīng) 出處:《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年09期
【摘要】:為了更快、更準(zhǔn)確的診斷山羊痘(Goat pox),根據(jù)GenBank上已公布的山羊痘病毒(GTPV)的基因序列,針對(duì)p32基因的保守序列設(shè)計(jì)并合成一對(duì)能特異性擴(kuò)增山羊痘病毒的引物,擴(kuò)增產(chǎn)物大小約為983bp。經(jīng)過(guò)反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了山羊痘病毒PCR檢測(cè)方法,對(duì)所建立的PCR反應(yīng)體系的特異性和靈敏性進(jìn)行了評(píng)價(jià),并用此方法對(duì)9份臨床樣品進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示,該診斷方法與3種非羊痘病毒不發(fā)生交叉反應(yīng)。該方法最低濃度檢測(cè)限為0.4pg。在檢測(cè)的臨床樣品中,GTPV陽(yáng)性有3份。結(jié)果表明,所建立的方法具有良好的特異性和敏感性,適合臨床診斷應(yīng)用。
[Abstract]:In order to diagnose Goat poxa more quickly and accurately, a pair of primers were designed and synthesized according to the conserved sequence of goat pox virus (GenBank) published on GenBank. The amplified product size was about 983 bp.After optimizing the reaction conditions, a method for detecting goat pox virus PCR was established. The specificity and sensitivity of the established PCR reaction system were evaluated, and 9 clinical samples were detected by this method.The results showed that the method did not cross-react with three non-sheep pox viruses.The detection limit of this method is 0.4pg.Three of the clinical samples tested were positive for GTPV.The results show that the established method has good specificity and sensitivity and is suitable for clinical diagnosis.
【作者單位】: 榆林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;榆林市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所;上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目(NYKJ-2015-023) 陜西省科技統(tǒng)籌項(xiàng)目(2015KTTSNY04-04)
【分類號(hào)】:S852.65
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本文編號(hào):1700876
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