本文選題：瘤胃纖維素降解細(xì)菌　切入點(diǎn)：單寧　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：本研究從內(nèi)蒙古綿羊瘤胃內(nèi)容物中分離瘤胃纖維素降解細(xì)菌,通過(guò)生理生化特性結(jié)合16SrDNA序列分析技術(shù)鑒定菌種·,體外培養(yǎng)分離出的瘤胃纖維降解細(xì)菌,分別添加濃度為0、100、200、400、600(μg/mL)的單寧,研究其對(duì)纖維降解細(xì)菌生長(zhǎng)特性、體外發(fā)酵參數(shù)、纖維降解特性以及細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響;挑選對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)和纖維降解影響較大的單寧濃度,添加單寧濃度二倍的聚乙二醇(PEG),通過(guò)纖維降解率、纖維素酶活力及發(fā)酵參數(shù)等指標(biāo)的檢測(cè),并用透射電鏡觀察細(xì)菌的形態(tài),研究添加PEG是否會(huì)屏蔽單寧對(duì)纖維降解細(xì)菌的影響。得出以下試驗(yàn)結(jié)果:1.本試驗(yàn)從綿羊瘤胃中分離得到了 8株纖維降解細(xì)菌,經(jīng)鑒定兩株為黃色瘤胃球菌(F1、F2)、兩株為產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌(FS1、FS2)、兩株為白色瘤胃球菌(A1、A2)、兩株為鏈球菌(S1、S2)。2.(1)體外培養(yǎng)添加單寧后抑制了瘤胃纖維降解細(xì)菌的生長(zhǎng),這種抑制作用隨單寧濃度增加而增強(qiáng);(2)1OOμg/mL和200μg/mL單寧顯著降低了 F2、FS1、S1、S2的產(chǎn)氣量(戶0.05),400μg/mL和600μg/mL單寧顯著降低8株纖維降解細(xì)菌的產(chǎn)氣量(戶0.05);(3)各株菌發(fā)酵液pH隨單寧濃度升高有升高的趨勢(shì);(4)添加100μg/mL單寧顯著降低除產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌FS1和FS2外其他6株菌發(fā)酵液的NH3-N 濃度(P0.05),200μg/mL 單寧顯著降低菌株 F2、FS1、FS2、A2、S1、S2發(fā)酵液的NH3-N濃度(P0.05),400μg/mL和600μg/mL單寧顯著降低8株細(xì)菌體外發(fā)酵NH3-N濃度(P0.05);(5)添加10Oμg/mL和200μg/mL單寧后除菌株S2外,其他菌株菌體蛋白濃度顯著降低(P0.05),400μg/mL和600μg/mL單寧顯著降低8株菌菌體蛋白濃度(P0.05);(6)10μg/mL單寧顯著降低F1、F2、FS1、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和總VFA濃度(P0.05),顯著降低FS2的乙酸、丁酸、總VFA濃度(P0.05);200μg/mL單寧顯著降低FS1、FS2、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和總VFA濃度(P0.05),顯著降低F1的丙酸、丁酸和總VFA濃度(P0.05);400μg/mL單寧顯著降低F2、FS1、A2、S1和S2的乙酸、丙酸、丁酸和總VFA濃度(P0.05),顯著降低F1、F2和FS2的乙酸、丁酸、總VFA濃度(P0.05):600μg/mL單寧酸顯著降低F1的丙酸、丁酸、總VFA濃度和FS2的乙酸、丁酸、總VFA濃度(P0.05),顯著降低FS1、A2、S1、S2的乙酸、丙酸、丁酸和總VFA濃度;(7)100μg/mL和200μg/mL單寧顯著抑制了菌株FS1、S1、A2的濾紙酶活力、羧甲基纖維素酶活力、微晶纖維素酶活力和水楊苷酶活力,并隨著單寧濃度升高酶活力顯著降低(P0.05),400μg/mL和600μg/mL單寧顯著抑制8株菌纖維素酶活力(P0.05);(8)100μg/mL和200μg/mL單寧顯著降低菌株F1、F2、FS2和A1纖維素降解率(P0.05),400μg/mL和600μg/mL單寧顯著抑制8株細(xì)菌纖維素降解率(P0.05)。(9)添加400μg/mL單寧可使菌體塌陷、變形,破壞細(xì)菌細(xì)胞膜,使菌體皺縮。3.添加2倍單寧濃度的PEG能夠減弱單寧對(duì)瘤胃纖維降解細(xì)菌生長(zhǎng)的影響,菌株的產(chǎn)氣量、菌體蛋白濃度、纖維素酶活力以及纖維素降解率均顯著高于單寧添加組(P0.05),但各菌株添加PEG后的產(chǎn)氣量,纖維素酶活力以及纖維素降解率均低于對(duì)照組。
[Abstract]:The study on separation of rumen cellulolytic bacteria from the rumen of the Inner Mongolia sheep, the physiological and biochemical characteristics and 16SrDNA sequence analysis, strain identification, rumen cellulolytic bacteria isolated from cultured in vitro were added at a concentration of 0100200400600 (g/mL) of tannin, on the cellulolytic bacteria growth characteristics, fermentation parameters in vitro. Effect of fiber degradation characteristics and morphology of bacteria; select larger tannin concentration effect on the growth and cellulolytic bacteria, adding polyethylene glycol tannin concentration two times (PEG), the fiber degradation rate, detection of cellulase activity and fermentation parameters, and the observation of bacterial morphology by transmission electron microscope, to study whether adding PEG will shield the tannin on cellulolytic bacteria. The following results: 1. of the 8 strains were isolated from the rumen of fine fiber degradation 鑿，

本文編號(hào)：1667205