本文選題：傳染性法氏囊病病毒(IBDV)　切入點(diǎn)：VP　出處：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：試驗(yàn)旨在研究一株傳染性法氏囊病病毒(IBDV)河南分離株的毒力特征及其與VP2氨基酸序列特征的關(guān)系。通過提取IBDV C4株RNA,利用RT-PCR擴(kuò)增其VP2基因,與其他不同毒力IBDV毒株進(jìn)行核苷酸及推導(dǎo)的氨基酸序列比對分析,同時(shí)使用pET-32a(+)原核表達(dá)載體表達(dá)VP2基因,用SDS-PAGE和Western blotting檢測重組VP2蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,擴(kuò)增的IBDV C4株的VP2基因序列在進(jìn)化關(guān)系上屬于超強(qiáng)毒力IBDV(vvIBDV)分類,與選取的vvIBDV毒株代表毒株核苷酸序列同源性在98.1%~98.7%之間,其七肽區(qū)為S-W-S-AS-G-S(第326—332位氨基酸)符合超強(qiáng)毒株特征,且222(A)、256(I)、294(I)和299(S)位氨基酸與超強(qiáng)毒力毒株的4個(gè)特征性氨基酸一致;但I(xiàn)BDV C4毒株的VP2蛋白氨基酸序列與超強(qiáng)毒力毒株代表毒株UK661相比,201(D/G)、281(G/R)、313(V/A)位氨基酸不同,其中281位氨基酸的改變處于279—290的小親水區(qū)內(nèi),與病毒抗原性有關(guān);構(gòu)建的pET-32a(+)-VP2原核表達(dá)載體在大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞上表達(dá)出分子質(zhì)量約67ku的重組VP2蛋白,為進(jìn)一步比較201(G)、281(R)、313(A)位氨基酸差異導(dǎo)致的抗原特性改變提供了研究基礎(chǔ)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,IBDV C4株VP2基因與vvIBDV毒株VP2基因的主要特性一致,但也有3處氨基酸與代表毒株UK661存在差異,這些改變可能與中國IBDV毒株毒力的進(jìn)化有關(guān)。
[Abstract]:The purpose of this study was to study the virulence of a strain of infectious bursal disease virus (IBDV) from Henan province and its relationship with the amino acid sequence of VP2. The VP2 gene of IBDV C4 strain was amplified by RT-PCR. Nucleotides and deduced amino acid sequences were compared with other virulent IBDV strains. The VP2 gene was expressed by pET-32a () prokaryotic expression vector, and the expression of recombinant VP2 protein was detected by SDS-PAGE and Western blotting. The VP2 gene sequence of the amplified IBDV C4 strain belongs to the highly virulent IBDVV vIBDVV classification in the evolutionary relationship. The nucleotide sequence homology with the selected vvIBDV strain is 98.1% and 98.7% respectively, and the heptapeptide region is S-W-S-AS-G-S (326-332 amino acid) in accordance with the characteristics of the supervirulent strain. The amino acid sequence of VP2 protein of IBDV C4 strain was different from that of UK661 strain, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661, and the amino acid sequence of VP2 protein of strain C 4 was different from that of strain UK661. The alteration of 281 amino acids was located in the small hydrophilic region of 279-290, which was related to the antigenicity of the virus. The constructed pET-32a (pET-32a) prokaryotic expression vector expressed a recombinant VP2 protein with a molecular weight of about 67 ku in Escherichia coli BL21 receptive cells. In order to further compare the changes of antigenic characteristics caused by the amino acid difference of RDV 313A, the results showed that the main characteristics of VP2 gene and VP2 gene of IBDV C4 strain were consistent with those of vvIBDV strain VP2, but there were also three amino acids differences between the three amino acids and the representative strain UK661. These changes may be related to the evolution of virulence of IBDV strains in China.
【作者單位】： 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;
【基金】：國家十三五科技專項(xiàng)(2017YFD0500701)
【分類號】：S852.65

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本文編號：1644058