本文選題：羊口瘡病毒　切入點(diǎn)：絲狀支原體簇　出處：《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立一種同時(shí)快速檢測(cè)羊口瘡病毒(ORFV)和絲狀支原體簇(Mm cluster)的方法,本研究根據(jù)ORFV的B2L基因和Mm cluster的16S r RNA基因序列,設(shè)計(jì)合成了2對(duì)特異性引物,通過條件優(yōu)化,建立了同時(shí)檢測(cè)ORFV核酸和Mm cluster核酸的雙重PCR方法。該方法可以同時(shí)擴(kuò)增出ORFV和Mm cluster的特異性片段,而對(duì)其它常見病原的DNA模板均無擴(kuò)增,對(duì)ORFV和Mm cluster的最低檢出量分別為3.8×10~4拷貝/μL和1.3×10~3拷貝/μL。利用該方法對(duì)36份臨床樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示雙重PCR檢測(cè)結(jié)果與單一PCR檢測(cè)結(jié)果符合率為100%。本研究建立的雙重PCR方法特異性強(qiáng),敏感性高,可重復(fù)性好,為臨床ORFV和Mm cluster的快速檢測(cè)、診斷及流行病學(xué)調(diào)查提供了方法。
[Abstract]:In order to establish a method for rapid detection of sheep mouth sore virus (ORFV) and mycoplasma mycoplasma (Mm cluster) simultaneously, two pairs of specific primers were designed and synthesized according to the sequence of B2L gene of ORFV and 16s r RNA gene of Mm cluster. A double PCR method for simultaneous detection of ORFV nucleic acid and Mm cluster nucleic acid was established. The specific fragments of ORFV and Mm cluster could be amplified simultaneously by this method, but the DNA templates of other common pathogens were not amplified. The minimum detectable amounts of ORFV and Mm cluster were 3.8 脳 10 ~ 4 copies / 渭 L and 1.3 脳 10 ~ 3 copies / 渭 L respectively. 36 clinical samples were detected by this method. The results showed that the coincidence rate between double PCR and single PCR was 100%. The double PCR method established in this study has the advantages of high specificity, high sensitivity and good repeatability. It is a rapid detection method for clinical ORFV and Mm cluster. Diagnostic and epidemiological surveys provide a method.
【作者單位】： 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;
【基金】：福建省公益類科研院所專項(xiàng)(2014R1023-6) 福建省公益科研院所專項(xiàng)(2014R1023-15) 福建省科技創(chuàng)新平臺(tái)建設(shè)項(xiàng)目(2014N2003-5) 國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0500906)
【分類號(hào)】：S852.6

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 顏新敏;張強(qiáng);;羊口瘡病毒的研究進(jìn)展[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2008年11期

2 閆豐超;邵佳;竇永喜;;羊口瘡病毒分子生物學(xué)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2013年01期

3 于永忠;佟春玉;宋佰芬;安紅波;余麗蕓;于力;崔玉東;;羊口瘡病毒干預(yù)宿主細(xì)胞泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的分子機(jī)制[J];病毒學(xué)報(bào);2013年06期

4 王光祥;尚佑軍;陳江濤;呂占祿;張克山;劉湘濤;;湖北省羊口瘡病毒的分離鑒定[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年11期

5 于永忠;譚強(qiáng);趙文博;包凱;崔玉東;;羊口瘡病毒黑龍江省分離株的分離鑒定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年08期

6 李瑞芳;李國(guó)華;孟仁;喬軍;張輝;陳創(chuàng)夫;;新疆羊口瘡病毒分離鑒定及B2L基因分析與表達(dá)[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年03期

7 向智龍;卓建華;程振濤;歐德淵;鮮思美;尹傳寶;黃璐;禾彩紅;;貴州地區(qū)羊口瘡病毒B2L基因克隆及原核表達(dá)載體構(gòu)建[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2011年07期

8 邱進(jìn)杰;張素輝;沈克飛;徐登峰;盧茵;;重慶地區(qū)山羊羊口瘡病毒的PCR鑒定分析[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年05期

9 孔漢金;張克山;劉永杰;尚佑軍;劉湘濤;吳斌;;羊口瘡病毒ORF125基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及其在真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的定位[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2014年08期

10 孔漢金;張克山;劉永杰;尚佑軍;劉湘濤;吳斌;;羊口瘡病毒B2L蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2014年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 何水林;陳杰;蔡玉書;姚龍濤;;羊口瘡病毒的分離與鑒定[A];第四屆中國(guó)畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周銘;羊口瘡病毒文登株和石林株毒力致弱及毒力相關(guān)基因的生物信息學(xué)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

2 楊鈺;羊口瘡病毒重慶株的分離鑒定及其F1L基因原核表達(dá)研究[D];貴州大學(xué);2015年

3 涂明亮;羊口瘡病毒生物學(xué)特性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

4 朱相儒;羊口瘡病毒和山羊痘病毒的分離鑒定及羊口瘡病毒B2L蛋白單克隆抗體的研制[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

5 張凱照;宿主凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白在羊口瘡病毒致炎中的作用研究[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 田婷婷;羊口瘡疫苗研制及其免疫效果評(píng)估[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

7 張瑜;羊口瘡病毒楊凌株和瀘西株的分離鑒定及毒力致弱研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

8 高晶暉;羊口瘡病毒威海株和昆明株的分離鑒定及毒力致弱研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

9 李杰;羊口瘡抗體ELISA檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

10 孔漢金;羊口瘡病毒感染宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)組變化及功能分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1641768