東北黑熊源糞腸球菌EfaA基因的克隆表達及生物信息學(xué)分析
發(fā)布時間:2018-03-16 09:28
本文選題:東北黑熊 切入點:糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原(EfaA) 出處:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為檢測熊源糞腸球菌心內(nèi)膜炎抗原(EfaA)基因,用于快速檢測東北黑熊糞腸球菌感染病例,本試驗根據(jù)GenBank登錄的糞腸球菌EfaA基因序列(登錄號:U03756.1)合成了1對PCR引物,通過PCR法擴增合成長度為689bp的目的片段。將PCR產(chǎn)物克隆于pMD19-T載體,之后將其轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5α感受態(tài)細胞篩選陽性克隆。提取擴增后的重組質(zhì)粒pMD19-T-EfaA并進行PCR、酶切鑒定、序列測定及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測。結(jié)果顯示,本試驗成功克隆出熊源糞腸球菌EfaA基因,與GenBank登錄的ATCC 29212菌株同源性為100.0%。本試驗成功構(gòu)建了重組克隆載體pMD19-T-EfaA,并對測序結(jié)果進行了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測,為進一步建立黑熊糞腸球菌病的診斷方法提供了理論依據(jù),同時也為黑熊疾病的防制奠定了基礎(chǔ)。
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本文編號:1619316
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