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副豬嗜血桿菌4種疑似毒力因子多克隆抗體的制備與鑒定

發(fā)布時間:2018-03-04 11:26

  本文選題:副豬嗜血桿菌 切入點:毒力因子 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:在利用蛋白質非標記定量技術(Lable-free)分析副豬嗜血桿菌強毒株與無毒株差異蛋白的基礎上,篩選出4種疑似毒力因子,通過基因擴增后克隆入原核表達載體p ET-32a,構建重組質粒,轉入Rosetta菌株后成功表達了目標蛋白。重組蛋白經親和層析純化后免疫小鼠,制備多克隆抗體,并將其與菌體蛋白進行Western blot驗證。結果表明,表達的4種蛋白免疫原性良好,制備的多克隆抗體免疫反應條帶單一。該研究為從蛋白水平上探討副豬嗜血桿菌毒力因子的功能奠定了基礎。
[Abstract]:Based on the analysis of the differentially expressed proteins between Haemophilus parasuis virulence strain and non-virulent strain by Lable-free, four suspected virulence factors were selected and cloned into prokaryotic expression vector pET-32a by gene amplification to construct the recombinant plasmid. The recombinant protein was purified by affinity chromatography to immunize mice, and the polyclonal antibody was prepared and verified by Western blot. The results showed that the four proteins expressed had good immunogenicity. The immunoreactive bands of polyclonal antibodies prepared were single, which laid a foundation for the study of virulence factor of Haemophilus parais at the protein level.
【作者單位】: 南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院/農業(yè)部動物細菌學重點開放實驗室;
【基金】:國家重點研發(fā)計劃(2016YFD0500701)
【分類號】:S852.61

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