本文選題：淺黃分枝桿菌　切入點：母牛分枝桿菌　出處：《吉林農業(yè)大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:利用母牛分枝桿菌和淺黃分枝桿菌建立小鼠非結核分枝桿菌持續(xù)感染模型。分析感染小鼠體內的免疫細胞、細胞因子和組織病理隨感染時間的動態(tài)變化。從而為探索非結核分枝桿菌感染的免疫學機制奠定基礎。方法:選取雌性C57BL/6小鼠,經腹腔注射感染母牛分枝桿菌和淺黃分枝桿菌。分別于感染后2、7、14、21、28、35天取材,稱量肝臟、脾臟、肺臟重量并制作病理切片經HE染色觀察感染小鼠器官的病理變化;通過熒光定量PCR檢測肝臟和脾臟中IFN-γ、TNF-α、TGF-β、NLRP3、IL-12b和IL-10 6種細胞因子mRNA水平表達量的變化;采用流式細胞術檢測脾臟CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞的細胞比例。結果:1、經母牛分枝桿菌感染的小鼠在整個感染過程中,肝臟和肺臟可見明顯的病理變化,感染后第7天,肝臟中這6種細胞因子的mRNA水平表達量達到了最低點,隨后逐漸增加一直到第28天,脾臟僅誘導微弱的IL-10、TNF-α、IL-12b和TGF-β的表達。CD4+T淋巴細胞的比例先降低后升高,CD8+T淋巴細胞的比例先升高后降低。2、經淺黃分枝桿菌感染的小鼠在整個感染過程中,肝臟、脾臟和肺臟均可見微弱的病理變化。肝和脾中IFN-γmRNA的表達逐漸增加。IL-12b在感染初期階段持續(xù)降低,感染后第14天降至最低,隨后逐漸升高。肝臟中IL-10的表達在感染后21天達到峰值,隨后逐漸降低,而脾臟中IL-10在感染后14天達到峰值,之后顯著降低。肝臟和脾臟中只誘導微弱的NLRP3、TNF-α和TGF-βmRNA的表達。CD4+T淋巴細胞的比例先降低后升高,CD8+T淋巴細胞的比例先升高后降低。結論:1、母牛分枝桿菌感染組,小鼠肝臟中IFN-γ、IL-12b、IL-10、NLRP3、TNF-α和TGF-β6種細胞因子的表達量均顯著高于脾臟,且肝臟顯示明顯的病理變化,表明肝臟的炎癥反應比脾臟更強烈。2、淺黃分枝桿菌感染組,小鼠肝臟和脾臟內IFN-γ、IL-12b和IL-10均發(fā)揮明顯的免疫效應,而NLRP3、TNF-α和TGF-β的表達量較低。3、CD4+、CD8+T淋巴細胞在非結核分枝桿菌感染過程中均發(fā)揮重要的免疫效應。
[Abstract]:Objective: to establish a continuous infection model of non-tuberculous mycobacterium in mice by using Mycobacterium cow and Mycobacterium palliformis, and to analyze the immune cells in infected mice. The dynamic changes of cytokines and histopathology with infection time laid a foundation for exploring the immunological mechanism of non-tuberculous Mycobacterium tuberculosis infection. Methods: female C57BL / 6 mice were selected. The infected mice were infected with Mycobacterium cow and Mycobacterium palliformis by intraperitoneal injection. The samples were collected on the 2nd day after infection, weighing the weight of liver, spleen and lung, and making pathological sections to observe the pathological changes of infected mouse organs by HE staining. The expression of TNF- 偽 TGF- 尾 -NLRP3IL-12b and IL-10 in liver and spleen were detected by fluorescence quantitative PCR. Flow cytometry was used to detect the percentage of CD4 and CD8 T lymphocytes in spleen. Results: the pathological changes of liver and lung were observed in mice infected with Mycobacterium vaccinalis during the whole process of infection, and the pathological changes were observed on the 7th day after infection. The expression of mRNA in the liver reached its lowest level, and then increased gradually until the 28th day. The percentage of IL-10 TNF- 偽 -IL-12b and TGF- 尾. CD4 T lymphocytes decreased first, then increased, and then decreased. 2. The liver of mice infected with Mycobacterium palliformis was observed in the whole process of infection. The expression of IFN- 緯 mRNA in liver and spleen increased gradually in the early stage of infection, decreased to the lowest on the 14th day after infection, and then increased gradually. The expression of IL-10 in liver reached its peak at 21 days after infection. Then decreased gradually, and the IL-10 in spleen reached a peak at 14 days after infection. The percentage of TNF- 偽 and TGF- 尾 mRNA in liver and spleen decreased first, then increased and then decreased. The expression of TNF- 偽 and TGF- 尾 in the liver of mice was significantly higher than that in the spleen, indicating that the inflammatory reaction of the liver was stronger than that of the spleen, and the inflammatory response of the liver was much stronger than that of the spleen, while the expression of TNF- 偽 and TGF- 尾 in the liver was significantly higher than that in the spleen, which indicated that the inflammatory reaction of the liver was stronger than that of the spleen. The expression of IFN- 緯 IL-12b and IL-10 in the liver and spleen of mice showed obvious immune effects, while the expression of NLRP3TNF- 偽 and TGF- 尾 was lower. The expression of CD4 / CD8 T cells in the liver and spleen of mice played an important immune effect in the process of infection with non-tuberculous Mycobacterium tuberculosis.
【學位授予單位】：吉林農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S852.4

【共引文獻】

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本文編號：1558319