本文關(guān)鍵詞： NLRs real-time PCR 環(huán)形泰勒蟲 轉(zhuǎn)錄水平　出處：《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：根據(jù)Gen Bank發(fā)表的相關(guān)序列,分別設(shè)計(jì)針對(duì)牛NOD樣受體(NLRs)信號(hào)通路10個(gè)相關(guān)分子NOD1、NOD2、NLRP1、NLRP3、NLRC4、NAIP、RIP2、CASP1、IL-18和IL-1β基因設(shè)計(jì)Real-time PCR特異性引物,通過優(yōu)化反應(yīng)條件后對(duì)其特異性、敏感性和重復(fù)性進(jìn)行評(píng)價(jià),并分別檢測(cè)環(huán)形泰勒蟲感染細(xì)胞Ta NM中靶基因的轉(zhuǎn)錄水平及其與對(duì)照的差異。結(jié)果顯示,所建立的分別檢測(cè)10個(gè)靶基因的Real-time PCR方法特異均非常,其敏感性均在1~100 copies/L之間;而在F10代Ta NM細(xì)胞中,NOD1、NOD2、NLRP1、NLRP3、NLRC4、NAIP、RIP2、CASP1和IL-18基因的轉(zhuǎn)錄水平均顯著低于對(duì)照組外周血單核細(xì)胞(P0.01),而IL-1β在F10代Ta NM細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄水平卻顯著高于對(duì)照組(P0.01)。本研究結(jié)果為開展環(huán)形泰勒蟲對(duì)宿主細(xì)胞天然免疫機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:According to the sequence of Gen published in Bank, were designed according to the bovine NOD like receptor 10 (NLRs) signaling pathway related molecules NOD1, NOD2, NLRP1, NLRP3, NLRC4, NAIP, RIP2, CASP1, IL-18 and IL-1 gene specific primers designed by PCR Real-time, the optimal reaction conditions for the specific evaluation the sensitivity and reproducibility, and to detect the transcription of Ta target genes in NM cells Taylor ring worm infection and its difference with the control. The results showed that the specific Real-time PCR were detected in 10 target genes are very sensitive, both in 1~100 and in F10 copies/L; Ta NM cells NOD1, NOD2, NLRP1, NLRP3, NLRC4, NAIP, RIP2, CASP1, and IL-18 gene transcription level were significantly lower than the control group in peripheral blood mononuclear cells (P0.01), and the transcriptional level of IL-1 beta in F10 generation Ta in NM cells was significantly higher than that of the control group (P0.01) in this study. The results laid the foundation for the study of the natural immune mechanism of the host cell in the ring-shaped Taylor worm.

【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅省動(dòng)物寄生蟲病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973)項(xiàng)目(2015CB150300) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31402189、31072130、31372432) 農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程(ASTIP)國(guó)家肉牛牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(NBCISCARS-38)
【分類號(hào)】：S852.7

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本文編號(hào)：1550643