本文關(guān)鍵詞： 雌二醇 單克隆抗體 間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA　出處：《中國(guó)畜牧獸醫(yī)》2017年10期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立敏感、特異、快速的雌二醇(estradiol,E2)殘留免疫檢測(cè)方法,本研究利用雌二醇人工抗原(E2-BSA)免疫BALB/c小鼠,應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備特異性雌二醇單克隆抗體,利用高效價(jià)、高特異性單克隆抗體建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA(ic ELISA)方法。結(jié)果顯示,試驗(yàn)成功篩選獲得一株穩(wěn)定分泌抗雌二醇抗體的雜交瘤細(xì)胞株(3H3),抗體效價(jià)可達(dá)1∶320 000,利用3H3腹水抗體優(yōu)化間接競(jìng)爭(zhēng)ic ELISA反應(yīng)條件,檢測(cè)抗體的敏感度,IC50為1.636 ng/m L,IC20~IC80線性范圍為0.202~13.281 ng/m L。雌二醇腹水抗體與雌三醇、乙炔雌二醇的交叉反應(yīng)率分別達(dá)0.31%和0.25%,而與雌酮、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、炔雌醚、己烯雌酚、壬基酚的交叉反應(yīng)率均0.1%。結(jié)果表明,利用本研究制備的單克隆抗體建立雌二醇間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法,可滿足食品中雌二醇?xì)埩舾哽`敏度的檢測(cè)要求。
[Abstract]:In order to establish a sensitive, specific and rapid method for the detection of estradiolium estradiolium E2), BALB/c mice were immunized with estradiol artificial antigen E2-BSA. specific estradiol monoclonal antibodies were prepared by lymphocyte hybridoma technique. An indirect competitive ELISA(ic Elisa method was established with highly specific monoclonal antibodies. The results showed that, A hybridoma cell strain with stable secretion of anti-estradiol antibody was successfully screened. The titer of the antibody was 1: 320 000. The indirect competitive ic ELISA reaction conditions were optimized by using 3H3 ascites antibody. The sensitivity of IC50 was 1.636 ng/m / L, and the linear range of IC20 / IC80 was 0.31% ng/m / L, 13.281 ng/m / L, respectively. The cross reaction rates of estradiol ascites antibody with estriol and ethylestradiol were 0.31% and 0.25, respectively. The cross reaction rates of nonylphenol were 0.1%. The results showed that the indirect competitive ELISA assay of estradiol with monoclonal antibody prepared in this study could meet the requirements of high sensitivity for the detection of estradiol residues in food.
【作者單位】： 溫州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院動(dòng)物科學(xué)研究所;溫州科技職業(yè)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：浙江省公益性技術(shù)研究農(nóng)業(yè)項(xiàng)目(2014C32046) 溫州市公益性社會(huì)發(fā)展科技項(xiàng)目(S20150026)
【分類號(hào)】：S859.84

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本文編號(hào)：1543608