羊泰勒蟲病二溫式PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用
本文關(guān)鍵詞: 羊泰勒蟲 表面蛋白基因 二溫式PCR 出處:《中國獸醫(yī)雜志》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為建立特異、敏感、快速的羊泰勒蟲病診斷方法。根據(jù)Gen Bank已報道的羊泰勒蟲表面蛋白基因(AY274329)設(shè)計合成了1對引物,通過條件優(yōu)化,建立了羊泰勒蟲病二溫式PCR診斷方法。該方法能擴增出335 bp的羊泰勒蟲特異性基因片段,測序結(jié)果與已知基因序列同源性為100%。對羊泰勒蟲基因組DNA的最小檢測量為16 fg/μL,與新孢子蟲、弓形蟲、巴貝斯蟲和瑟氏泰勒蟲均無交叉反應(yīng)。與普通PCR相比,二溫式-PCR在敏感性方面無顯著差異,但其反復(fù)升溫降溫時間消耗短。結(jié)果表明,二溫式PCR診斷方法具有較高的特異性和敏感性,可用于羊泰勒蟲病的快速診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a specific, sensitive and rapid diagnostic method for Taylor's disease, a pair of primers were designed and synthesized according to the surface protein gene AY274329 reported by Gen Bank. A two-temperature PCR method for the diagnosis of Taylor's disease in sheep was established. The results showed that the sequence homology with known gene sequence was 100. The minimum detection of genomic DNA was 16 fg / 渭 L. There was no cross reaction with Neosporidium, Toxoplasma gondii, Babes and Taylor Cervus. There was no significant difference in sensitivity between two temperature and PCR methods, but the time of repeated heating and cooling was short. The results showed that the two temperature PCR diagnostic method had high specificity and sensitivity, and could be used for rapid diagnosis and epidemiological investigation of Taylor's disease in sheep.
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動物科技學(xué)院;預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點實驗室;延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】:吉林省科技發(fā)展計劃項目(20150623004TC) 吉林省重點學(xué)科培育項目(吉農(nóng)院合字[2015]第x030號) 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項目(吉農(nóng)院合字[2014]第Z07號)
【分類號】:S858.26;S858.27
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,本文編號:1542288
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