本文關(guān)鍵詞： 鵝肥肝 胰島素抵抗 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 衣霉素 葡萄糖耐受試驗(yàn) 胰島素耐受試驗(yàn)　出處：《揚(yáng)州大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的日漸流行給人類(lèi)的健康造成了巨大威脅。隨著相關(guān)研究的增多,對(duì)人類(lèi)及哺乳類(lèi)模式動(dòng)物NAFLD形成機(jī)制的認(rèn)識(shí)已取得較大的進(jìn)展。研究表明哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress, ERS)對(duì)胰島素抵抗(Insulin resistance, IR)的形成十分重要,而IR可誘發(fā)高胰島素血癥,將促進(jìn)肝臟中的脂肪合成。相對(duì)于哺乳動(dòng)物,作為重要禽產(chǎn)品的鵝肥肝,有關(guān)其形成機(jī)制的研究和認(rèn)識(shí)還相當(dāng)匱乏。鵝與哺乳類(lèi)動(dòng)物在進(jìn)化樹(shù)上存在較大的遺傳距離,在營(yíng)養(yǎng)代謝特別是脂肪代謝方面有些不同的特點(diǎn)。因此,作為哺乳動(dòng)物NAFLD重要形成機(jī)制的ERS和IR是否同樣適用于鵝肥肝還不清楚。本試驗(yàn)圍繞這一關(guān)鍵問(wèn)題在細(xì)胞與活體兩個(gè)層面上展開(kāi)研究：鵝原代肝細(xì)胞在高能營(yíng)養(yǎng)因子(高葡萄糖和高飽和脂肪酸)刺激后,檢測(cè)ERS標(biāo)記基因(如Grp78和Xbp1)在這些細(xì)胞中的mRNA水平；采用藥物和強(qiáng)制飼喂兩種方式處理鵝一定時(shí)間后,對(duì)試驗(yàn)鵝進(jìn)行血糖、葡萄糖耐受試驗(yàn)、胰島素耐受試驗(yàn)、剖檢以及基因表達(dá)分析。主要研究結(jié)果如下：1、高能營(yíng)養(yǎng)因子的刺激可誘導(dǎo)鵝原代肝細(xì)胞產(chǎn)生ERS。本研究利用高能營(yíng)養(yǎng)因子(高葡萄糖和高飽和脂肪酸)處理鵝原代肝細(xì)胞,并在此基礎(chǔ)上添加不飽和脂肪酸(如油酸、亞油酸),熒光定量PCR檢測(cè)ERS標(biāo)記基因-Grp78和Xbp1的mRNA水平。結(jié)果顯示高葡萄糖和高棕櫚酸處理鵝原代肝細(xì)胞后,Grp78和Xbp1的mRNA水平都有不同程度的上調(diào),表明高能營(yíng)養(yǎng)因子能誘導(dǎo)鵝原代肝細(xì)胞產(chǎn)生ERS；油酸和亞油酸處理細(xì)胞后,棕櫚酸所誘導(dǎo)的Grp78和Xbp1的mRNA表達(dá)增加受到明顯抑制(P0.05)。以上結(jié)果說(shuō)明,高能營(yíng)養(yǎng)因子可引起鵝原代肝細(xì)胞產(chǎn)生ERS,而不飽和脂肪酸可抑制這種誘導(dǎo)。2、藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的ERS可引起鵝全身性IR和脂肪肝的形成。本試驗(yàn)選用兩種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑即衣霉素和毒胡蘿卜素(主要作用于肝臟),處理?yè)P(yáng)州鵝20 d,并對(duì)試驗(yàn)鵝進(jìn)行血糖、葡萄糖耐受試驗(yàn)、剖檢分析以及檢測(cè)Grp78和Xbp1在肝臟中的]mRNA水平。結(jié)果顯示相對(duì)于對(duì)照組,Grp78和Xbp1在衣霉素肝臟中的mRNA表達(dá)水平極顯著上調(diào)(P0.01)；20天衣霉素飼喂也引起鵝對(duì)葡萄糖耐受能力明顯下降,且鵝肝也從深紅色轉(zhuǎn)變?yōu)橹靖蔚耐咙S色,這表明ERS可引起鵝產(chǎn)生IR,并促進(jìn)脂肪肝的形成；毒胡蘿卜素注射試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)衣霉素試驗(yàn)的結(jié)論。3、填肥可引起鵝IR和脂肪肝形成,但并不通過(guò)ERS的途徑。對(duì)70日齡朗德鵝進(jìn)行正�；驈�(qiáng)制飼喂,在77和84日齡對(duì)禁食的試驗(yàn)鵝進(jìn)行GTT試驗(yàn),并在85日齡時(shí)測(cè)定了未禁食試驗(yàn)鵝的血糖水平,在88日齡禁食的試驗(yàn)鵝進(jìn)行ITT試驗(yàn)以及在強(qiáng)制飼喂一段時(shí)間后,屠宰部分試驗(yàn)鵝取肝樣用于檢測(cè)ERS標(biāo)記基因的mRNA水平。結(jié)果表明相對(duì)于正常飼養(yǎng)的對(duì)照組,填肥沒(méi)有誘導(dǎo)ERS,可能與脂肪酸去飽和酶的上調(diào)有關(guān)。不過(guò),填肥鵝在強(qiáng)制飼喂7天后就開(kāi)始出現(xiàn)葡萄糖耐受能力下降的現(xiàn)象。在14天時(shí),這種現(xiàn)象更加明顯。在填肥15天時(shí),非禁食狀態(tài)下填肥鵝的基礎(chǔ)血糖值也極顯著高于對(duì)照組(P0.01)。在18天時(shí),ITT試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明填肥鵝在脂肪肝形成過(guò)程中出現(xiàn)了胰島素抵抗。這種IR現(xiàn)象和填肥鵝肝臟呈現(xiàn)嚴(yán)重的土黃色脂肪肝密切關(guān)聯(lián)。綜上所述,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可引起鵝IR和脂肪肝,但強(qiáng)制填飼所引起的鵝IR和脂肪肝并不依賴(lài)于ERS途徑。鵝胰島素抵抗與脂肪肝的形成密不可分,胰島素抵抗是脂肪肝形成的重要機(jī)制。
[Abstract]:Non alcoholic fatty liver (Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD) is endemic to the human health threat. With the increase of relevant research, understanding the formation mechanism of human and mammalian animal model of NAFLD has made great progress. The research showed that mammalian animal liver cell endoplasmic reticulum stress (endoplasmic reticulum, stress, ERS insulin resistance (Insulin) of resistance, IR) formation is very important, but IR can induce hyperinsulinemia, promote fat synthesis in the liver. Compared with mammals, as an important bird of goose liver products, research and understanding about its mechanisms is still quite scarce. Goose and mammalian animal genetic distance the larger the evolutionary tree in nutrient metabolism especially fat metabolism are different. Therefore, as an important mechanism for the formation of the mammalian NAFLD ERS and IR The same applies to the goose liver is not clear. This experiment focuses on the key issues in two aspects: living cells and goose primary hepatocytes in high nutritional factors (high glucose and high saturated fatty acid) after stimulation, detection of ERS marker genes (Grp78 and Xbp1) in these cells. The mRNA level of processing time; goose using drugs and forced feeding in two ways, the blood sugar test on goose, glucose tolerance test and insulin tolerance test, autopsy and gene expression analysis. The main results are as follows: 1, high-energy nutrition factor stimulation can produce high-energy nutrient factors in this study using ERS. goose primary hepatocytes (induced by high glucose and high saturated fatty acid) in primary processing of goose liver cells, and on the basis of adding unsaturated fatty acids (such as oleic acid, linoleic acid), fluorescence quantitative PCR detection of ERS marker gene -Grp78 and Xbp1 mRNA Ping. The results showed that high glucose and palmitate treatment of goose primary hepatocytes after Xbp1, Grp78 and mRNA levels have different degrees of increase, indicating that high-energy nutritional factors can induce goose primary hepatocytes ERS; oleic acid and linoleic acid treated cells after induced by palmitic acid Grp78 and Xbp1 mRNA expression the increase was significantly inhibited (P0.05). These results indicated that high-energy nutritional factors can cause goose primary hepatocytes to produce ERS, and unsaturated fatty acid can inhibit the.2 induced drug induced ERS can cause the formation of goose fatty liver and systemic IR. This experiment selects two kinds of endoplasmic reticulum stress induced agent tunicamycin and thapsigargin (mainly in liver), Yangzhou goose was 20 D, and blood glucose test on goose, glucose tolerance test, autopsy analysis and detection of Grp78 and Xbp1 in the liver]mRNA level. The results showed that compared with the control group Xbp1, Grp78 and tunicamycin in liver mRNA expression level was significantly increased (P0.01); 20 Tianyi mycin also caused goose feeding glucose tolerance decreased significantly, and also from the deep into the red goose fatty liver khaki, which indicates that ERS can cause the goose to produce IR, and promote the formation of fat liver; thapsigargin injection test results confirmed that tunicamycin test conclusion.3, overfeeding can cause goose IR and fatty liver, but not by ERS way. The normal or forced feeding on 70 day old Landes, at 77 and 84 days of fasting test goose GTT test and determination of blood glucose levels without fasting test geese at the age of 85 days, the ITT test at the age of 88 days of fasting and geese in forced feeding after a period of time, the slaughter of the goose liver like part of the test for the detection of ERS marker gene mRNA level. The results show that the phase for it The control group is raised, overfeeding did not induce ERS may be related to the upregulation of fatty acid desaturase. However, overfeeding geese in forced feeding 7 days began to decline glucose tolerance phenomenon. In 14 days, this phenomenon is more obvious. Fill in fertilizer 15 days, non fasting blood sugar under the condition of filling fat goose value is significantly higher than the control group (P0.01). On the 18 day, the ITT test result shows that fill fat goose appeared in the process of the development of insulin resistance in fatty liver. The IR phenomenon and overfeeding goose liver showed serious yellow fatty liver was closely related. In summary, the endoplasmic reticulum stress can cause the goose IR and fatty liver, but forced feeding caused by goose IR and fatty liver is not dependent on ERS pathway. The formation of goose insulin resistance and fatty liver is closely related to insulin resistance is an important mechanism for the formation of fatty liver.

【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S858.33

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張路,李強(qiáng);優(yōu)質(zhì)鵝肥肝的摘取技術(shù)[J];湖南畜牧獸醫(yī);2002年06期

2 劉五岳;鵝肥肝生產(chǎn)中的問(wèn)題及對(duì)策[J];農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù);2002年09期

3 江徑偉;鵝肥肝生產(chǎn)中的育雛技術(shù)[J];養(yǎng)禽與禽病防治;2002年07期

4 ;怎樣育鵝肥肝?[J];農(nóng)家之友;2002年02期

5 張路;李強(qiáng);;優(yōu)質(zhì)鵝肥肝的摘取技術(shù)[J];農(nóng)家之友;2002年09期

6 張路,李強(qiáng);優(yōu)質(zhì)鵝肥肝的摘取技術(shù)[J];中國(guó)畜牧雜志;2003年05期

7 張士泉;制取優(yōu)質(zhì)鵝肥肝的技術(shù)[J];農(nóng)產(chǎn)品加工;2003年08期

8 張永江;生產(chǎn)肥肝鵝的管理[J];農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù);2003年12期

9 張永江;鵝肥肝的生產(chǎn)技術(shù)[J];農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù);2003年12期

10 劉旭光;鵝肥肝生產(chǎn)現(xiàn)狀及關(guān)鍵技術(shù)[J];中國(guó)動(dòng)物保健;2003年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳耀王;;鵝肥肝的營(yíng)養(yǎng)生產(chǎn)簡(jiǎn)史和展望[A];首屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊——中國(guó)水禽業(yè)進(jìn)展[C];2005年

2 王寶維;于世浩;;鵝肥肝產(chǎn)業(yè)面臨的困境與解決方案[A];2007第二屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊[C];2007年

3 朱麗慧;徐國(guó)慶;段修軍;張軍;孟和;龔道清;;抑制性消減雜交方法篩選鵝肥肝形成中差異表達(dá)基因[A];中國(guó)家禽科學(xué)研究進(jìn)展——第十四次全國(guó)家禽科學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

4 許鋒;王繼文;呂品;;鵝肥肝生產(chǎn)的現(xiàn)狀與前景[A];首屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊——中國(guó)水禽業(yè)進(jìn)展[C];2005年

5 鄭方國(guó);;肥肝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的基本要素[A];中國(guó)禽業(yè)發(fā)展大會(huì)暨中國(guó)畜牧業(yè)協(xié)會(huì)禽業(yè)分會(huì)第二屆會(huì)員代表大會(huì)論文集[C];2007年

6 陳耀王;陳開(kāi)洋;;鮮、凍鵝肥肝質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(討論稿)[A];2007第二屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊[C];2007年

7 范永存;王寶維;張名愛(ài);王巧莉;張倩;孫鵬;王娜;姜曉霞;;不同脂肪對(duì)肥肝鵝脂質(zhì)過(guò)氧化與抗氧化功能的影響[A];中國(guó)家禽科學(xué)研究進(jìn)展——第十四次全國(guó)家禽科學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

8 于世浩;王寶維;范永存;張倩;王巧莉;荊麗珍;岳斌;;朗德鵝肥肝重與體型指標(biāo)相關(guān)及聚類(lèi)分析[A];中國(guó)家禽業(yè)——機(jī)遇與挑戰(zhàn)——第十三次全國(guó)家禽學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2007年

9 鄭方國(guó);張福君;;淺析中國(guó)肥肝產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀——品VDL美食,享尚品人生[A];第三屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊[C];2009年

10 王來(lái)有;;鵝產(chǎn)品特點(diǎn)及開(kāi)發(fā)利用前景[A];第四屆中國(guó)水禽發(fā)展大會(huì)會(huì)刊[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 王云中;合浦“鵝肥肝”列為我區(qū)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化龍頭項(xiàng)目[N];廣西日?qǐng)?bào);2001年

2 本報(bào)記者 孫宏波 柳青;世界一流的鵝肥肝生產(chǎn)基地在長(zhǎng)落成[N];吉林日?qǐng)?bào);2004年

3 記者胡斌、龐革平;中法合作開(kāi)發(fā)鵝肥肝產(chǎn)業(yè)研討會(huì)舉行[N];人民日?qǐng)?bào);2002年

4 王中西;我國(guó)鵝肥肝生產(chǎn)有優(yōu)勢(shì)[N];山東科技報(bào);2005年

5 記者　 孫建;我國(guó)鵝肥肝產(chǎn)量位居世界第三[N];農(nóng)民日?qǐng)?bào);2006年

6 孫建 蘇寶瑞;我國(guó)鵝肥肝產(chǎn)量位居世界第三[N];中國(guó)現(xiàn)代企業(yè)報(bào);2006年

7 胡安民　劉廣友;養(yǎng)殖肥肝鵝致富有門(mén)道[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2009年

8 ;鵝肥肝——亟待開(kāi)發(fā)的“金礦”[N];中國(guó)畜牧報(bào);2002年

9 孫耀華;發(fā)展鵝肥肝產(chǎn)業(yè)應(yīng)瞄準(zhǔn)國(guó)際市場(chǎng)[N];中國(guó)畜牧報(bào);2002年

10 王曉明;鵝肥肝被堵國(guó)門(mén)之內(nèi)[N];中國(guó)質(zhì)量報(bào);2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 趙阿勇;鵝肝臟差異表達(dá)基因的分離和鑒定暨茶多酚對(duì)朗德鵝肥肝抗氧化性能影響的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王倩倩;miR-29c在鵝肥肝形成中的表達(dá)與功能研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

2 夏麗麗;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、胰島素抵抗與鵝肥肝形成的關(guān)系研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

3 劉忠華;鵝正常肝臟與肥肝差異表達(dá)蛋白質(zhì)檢測(cè)與分析[D];揚(yáng)州大學(xué);2008年

4 鞠美玲;低溫環(huán)境下烹飪鵝肥肝的營(yíng)養(yǎng)及工藝優(yōu)化研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

5 席海龍;安徽省鵝肥肝產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀與策略研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

6 徐國(guó)慶;鵝肥肝中差異表達(dá)基因的篩選及分析[D];揚(yáng)州大學(xué);2008年

7 楊X;鵝CYP7A1基因克隆、表達(dá)調(diào)節(jié)及表達(dá)規(guī)律的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 朱麗慧;抑制性消減雜交方法篩選鵝肥肝中差異表達(dá)基因[D];揚(yáng)州大學(xué);2010年

9 魏建軍;茶多酚對(duì)朗德鵝肥肝生產(chǎn)性能和抗氧化功能及血液生化指標(biāo)影響的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 范文娜;維生素E對(duì)溆浦鵝肥肝抗氧化性能和血液生化指標(biāo)影響的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：1537165