本文關(guān)鍵詞： 鴨腸炎病毒 核衣殼蛋白 RNA干擾 熒光定量PCR　出處：《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為探究核衣殼蛋白(NP)對鴨腸炎病毒(DEV)增殖的影響,筆者根據(jù)GenBank上DEV-NP基因序列,設(shè)計(jì)并構(gòu)建pSilencer-DEV-NP,采用三種不同方式處理轉(zhuǎn)染鴨胚成纖維(DEF)細(xì)胞后,應(yīng)用熒光顯微鏡法和FQ-PCR法分析pSilencer-DEV-NP對DEV增殖的影響,結(jié)果顯示:經(jīng)熒光顯微鏡法觀察,pSilencer-DEV-NP-l~4在DEF細(xì)胞中均呈現(xiàn)綠色熒光;FQ-PCR法擴(kuò)增并計(jì)算,pSilencer-DEV-NP-l~4對DEV增殖的沉默效率分別為81.10%、72.69%、77.35%和67.69%;采用三種方法處理,pSilencer-DEV-NP-1對DEF細(xì)胞中DEV的增殖均有沉默作用,但沉默效率不盡一致,其中先后轉(zhuǎn)染后感染時pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果最好,在處理60h時沉默效率高達(dá)69.20%;同時轉(zhuǎn)染和感染時pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果次之,在處理48h時沉默效率最好僅達(dá)63.79%;先感染后轉(zhuǎn)染時pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果較差,在處理60h時沉默效率最高僅為52.58%。上述研究結(jié)果提示,核衣殼蛋白對鴨腸炎病毒增殖具有一定的影響,為闡明核衣殼蛋白在鴨腸炎病毒復(fù)制與增殖的作用機(jī)制奠定了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to investigate the effect of nucleocapsid protein (NPV) on the proliferation of duck enteritis virus (GenBank), pSilencer-DEV-NPs were designed and constructed according to the sequence of DEV-NP gene on GenBank. The effects of pSilencer-DEV-NP on the proliferation of DEV were analyzed by fluorescence microscope and FQ-PCR method. The results showed that the silencing efficiency of pSilencer-DEV-NP-lO4 in DEF cells was 77.35% and 67.699.The silencing efficiency of pSilencer-DEV-NP-lO4 on DEV proliferation was 77.35% and 67.699.The silencing efficiency of pSilencer-DEV-NP-1was 77.35% and 67.699.The silencing effect of pSilencer-DEV-NP-1 on the proliferation of DEV in DEF cells was observed by three methods. But the silencing efficiency was not consistent, among which the silencing effect of pSilencer-DEV-NP-1 was the best after transfection, and the silencing efficiency was 69.20g at 60h, and the silencing effect of pSilencer-DEV-NP-1 was the second at the same time of transfection and infection. The best silencing efficiency was 63.79 at 48h, but the silencing effect of pSilencer-DEV-NP-1 was poor after infection and transfection, and the silencing efficiency was 52.58 at 60h. The results suggested that nucleocapsid protein had a certain effect on the proliferation of duck enteritis virus. It lays a theoretical foundation for elucidating the mechanism of nucleocapsid protein in the replication and proliferation of duck enteritis virus.
【作者單位】： 貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;貴州省動物疫病與獸醫(yī)公共衛(wèi)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;遵義市動物衛(wèi)生監(jiān)督所;遵義市獸藥飼料監(jiān)測站;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260607;31560703) 貴州省優(yōu)秀青年科學(xué)人才培養(yǎng)計(jì)劃項(xiàng)目(黔科合人字[2013]25號) 貴州省百層次創(chuàng)新型人才項(xiàng)目(黔科合人才[2016]4009號) 貴州省科技創(chuàng)新人才團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目(黔科合人才團(tuán)隊(duì)[2015]4016號) 貴州大學(xué)研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目(研農(nóng)2016022)
【分類號】：S852.65

【參考文獻(xiàn)】

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