本文關鍵詞： 板藍根多糖 黃芪多糖 干擾素 PRV　出處：《河南農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的與意義:通過體外試驗測定板蘭根多糖、黃芪多糖與干擾素聯(lián)合應用對豬偽狂犬效果研究,從而給偽狂犬病的預防及治療提供一種新的可行方法。采用了常規(guī)的水煎醇沉法來提取多糖,然后使用蒽酮硫酸法來測定多糖的含量,從而得到板藍根多糖和黃芪多糖;體外構建重組質粒pGEX-IFN-α,并將其轉化入大腸桿菌BL21后,經(jīng)IPTG的誘導下,在大腸桿菌中表達出豬α干擾素融合蛋白。SDS-PAGE和Western blotting分析,優(yōu)化IPTG的濃度和誘導時間,提高表達水平。通過形態(tài)觀察法、MTT法判斷板藍根多糖、黃芪多糖、干擾素以及多糖與干擾素的聯(lián)合應用對豬偽狂犬病病毒的抑制效果。板藍根多糖、黃芪多糖和干擾素半數(shù)抑制濃度分別為250μg/ml、500μg/ml和100.7U/ml。測定了藥物聯(lián)合應用的合并指數(shù),結果表明板藍根多糖125μg/ml、黃芪多糖250μg/ml、和重組豬α干擾素50U/mL三者聯(lián)合使用時,抑制病毒的效果最好,豬偽狂犬病病毒的抑制率達到70.26%。
[Abstract]:Objective and significance: to study the effect of the combination of Polysaccharide, Astragalus Polysaccharide and Interferon on Pig pseudorabies in vitro. In order to provide a new and feasible method for the prevention and treatment of pseudorabies, the polysaccharide was extracted by conventional decoction and alcohol precipitation method, and the content of polysaccharide was determined by anthrone sulfuric acid method, and the polysaccharides of Radix Isatidis and Radix Astragali were obtained. The recombinant plasmid pGEX-IFN- 偽 was constructed in vitro and transformed into Escherichia coli BL21. After induction by IPTG, porcine interferon 偽 fusion protein. SDS-PAGE and Western blotting analysis were expressed in E. coli to optimize the concentration and induction time of IPTG. To evaluate the inhibitory effect of polysaccharides of Radix Isatidis, Astragalus membranaceus, Interferon and the combination of polysaccharides and interferon on porcine pseudorabies virus. Astragalus polysaccharide and interferon half inhibitory concentration were 250 渭 g / ml and 100.7 U / ml, respectively. The combined index of the combined drug application was determined. The results showed that the combination of Astragalus polysaccharide 125 渭 g / ml, astragalus polysaccharide 250 渭 g / ml, and recombinant porcine interferon 偽 50 U / mL had the best inhibitory effect on the virus. The inhibition rate of pseudorabies virus was 70.26%.
【學位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S853.7

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本文編號：1504747