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牛新孢子蟲病間接熒光抗體診斷方法的建立及流行病學(xué)調(diào)查

發(fā)布時間:2016-10-14 17:22

  本文關(guān)鍵詞:牛布魯氏菌疫苗株轉(zhuǎn)座子突變文庫構(gòu)建及毒力基因的初步鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《延邊大學(xué)》 2006年

牛新孢子蟲病間接熒光抗體診斷方法的建立及流行病學(xué)調(diào)查

蔡光烈  

【摘要】:新孢子蟲病(Neosporiasis)是由犬新孢子蟲(Neospora caninum)寄生于犬、牛、馬、羊等多種宿主動物細胞內(nèi)而引起的一種原蟲病。該病對牛的危害尤為嚴重,主要造成孕畜流產(chǎn)、死胎以及新生犢牛的運動神經(jīng)系統(tǒng)疾病。目前新孢子蟲病的研究已成為國內(nèi)外獸醫(yī)寄生蟲學(xué)界的熱點問題,在我國對該領(lǐng)域的研究剛剛起步。 本研究以體外培養(yǎng)于Vero細胞上的犬新孢子蟲美國分離株Nc-1作為抗原,,包被到載玻片上,用異硫氰酸熒光素(FITC)標記的兔抗牛IgG作為二抗,建立了間接熒光抗體試驗方法(IFAT)。對IFAT的反應(yīng)條件進行了摸索,確定了最適工作條件。結(jié)果表明,新孢子蟲蟲體最佳工作稀釋度為5×10~3-5×10~4個/ml,F(xiàn)TIC-兔抗牛IgG(H+L)的最適工作稀釋度為1:80,待檢血清最適工作稀釋度為1:200。經(jīng)交叉反應(yīng)試驗和重復(fù)性試驗,表明建立的間接熒光抗體診斷方法是特異的,且重復(fù)性良好。本試驗診斷方法能夠同時檢測大批量樣品,對牛新孢子蟲病疫情的監(jiān)測有一定的指導(dǎo)意義。 采集吉林省21個縣、市的1091份牛血清樣本,用所建立的間接熒光抗體試驗方法(IFAT)檢測牛新孢子蟲血清抗體,首次對吉林省地區(qū)進行牛新孢子蟲病的流行病學(xué)調(diào)查。調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn),1091份牛血清樣本中189份血清的牛新孢子蟲抗體呈陽性,試驗測得的血清陽性率為17.32%。將血清樣本的檢測結(jié)果按不同地區(qū)、性別、年齡、胎次分別進行比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)牛新孢子蟲的感染情況在性別、年齡、胎次上無明顯差異,但在地區(qū)上稍微有所差異,與現(xiàn)可查牛新孢子蟲病流行病學(xué)調(diào)查報道基本一致。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:S854.4;S858.23
【目錄】:

  • 摘要4-5
  • Abstract5-6
  • 第一章 前言6-19
  • 1.1 牛新孢子蟲病的研究進展6-17
  • 1.2 牛新孢子蟲病的危害17-18
  • 1.3 本課題的研究目的及意義18-19
  • 第二章 材料與方法19-23
  • 2.1 材料19-21
  • 2.1.1 新孢子蟲體外培養(yǎng)所需材料19
  • 2.1.2 新孢子蟲抗原包被所需材料19
  • 2.1.3 間接熒光抗體試驗所需材料19-20
  • 2.1.4 交叉反應(yīng)試驗所需材料20
  • 2.1.5 流行病學(xué)調(diào)查所需材料20
  • 2.1.6 主要試驗儀器20-21
  • 2.2 方法21-23
  • 2.2.1 新孢子蟲體外培養(yǎng)21
  • 2.2.2 新孢子蟲抗原包被21
  • 2.2.3 間接熒光抗體試驗21-22
  • 2.2.4 重復(fù)性試驗22
  • 2.2.5 交叉反應(yīng)試驗22
  • 2.2.6 流行病學(xué)調(diào)查22-23
  • 第三章 結(jié)果23-27
  • 3.1 新孢子蟲體外培養(yǎng)23
  • 3.2 間接熒光抗體試驗23-24
  • 3.3 重復(fù)性試驗24
  • 3.4 交叉反應(yīng)試驗24
  • 3.5 流行病學(xué)調(diào)查24-27
  • 第四章 討論27-31
  • 第五章 結(jié)論31-32
  • 參考文獻32-38
  • 致謝38
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    本文編號:140636

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