發(fā)布時(shí)間：2017-12-13 19:08

  本文關(guān)鍵詞：豁眼鵝卵巢組織產(chǎn)蛋性能相關(guān)基因的篩選及表達(dá)分析

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【摘要】：本研究以遼寧豁眼鵝為試驗(yàn)對(duì)象,首先提取產(chǎn)蛋期和休產(chǎn)期的卵巢組織總RNA,利用Illumina HiSeq 2000高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行測(cè)序,篩選差異表達(dá)的基因,應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)其功能進(jìn)行預(yù)測(cè)性分析,然后擴(kuò)增與卵巢生殖激素合成和分泌相關(guān)的3個(gè)基因：StAR、 CYP11A1, CYP19A1的部分片段。最后應(yīng)用Real-Time PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)檢測(cè)豁眼鵝產(chǎn)蛋周期不同階段卵巢組織中3個(gè)基因的表達(dá)量變化情況,并通過(guò)生物信息學(xué)分析對(duì)其進(jìn)行分析,以初步闡明StAR、 CYP11A1、CYP19A1 mRNA及蛋白表達(dá)水平與豁眼鵝產(chǎn)蛋性能之間的關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果如下：(1)成功篩選并鑒定出688個(gè)顯著差異表達(dá)基因,其中344個(gè)上調(diào)基因和344個(gè)下調(diào)基因,這些基因主要參與類固醇類激素合成、促性腺激素釋放激素信號(hào)通路、卵母細(xì)胞減數(shù)分裂、孕激素介導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟、類固醇合成、鈣信號(hào)傳導(dǎo)途徑等生理過(guò)程。(2)成功獲得豁眼鵝StAR、 CYP11A1、 CYP19A1基因部分目的片段,大小依次為449 bp、272 bp、 498 bp;相似性分析發(fā)現(xiàn),豁眼鵝StAR基因與鴻雁和綠頭鴨的相似性最高,分別為99%和94%；豁眼鵝CYPUA1基因與鴻雁的相似性是99%,綠頭鴨是97%。豁眼鵝CYP19A1基因與鴻雁、綠頭鴨的相似性是99%,與家雞是93%。(3)產(chǎn)蛋周期不同階段(3月份、5月份、8月份、11月份)StAR、 CYP11A1、 CYP19A1 mRNA的表達(dá)趨勢(shì)均為先上升后下降,且均為5月份表達(dá)量顯著高于其他月份,其中StAR、 CYP11A1 mRNA的表達(dá)量11月份最低,而CYP19A1則3月份最低；StAR、 CYPUA1、 CYP19A1 mRNA表達(dá)量在各月份之間差異顯著。StAR、 CYP11A1、 CYP19A1三種蛋白表達(dá)量的變化趨勢(shì)與對(duì)應(yīng)的mRNA基本一致,均表現(xiàn)為先上升后下降。本研究表明,StAR、 CYP11A1、 CYP19A1等與生殖激素合成相關(guān)的基因在豁眼鵝產(chǎn)蛋周期不同階段的卵巢組織中呈現(xiàn)出差異表達(dá)現(xiàn)象,并呈現(xiàn)一定的表達(dá)規(guī)律,推測(cè)其可能參與豁眼鵝產(chǎn)蛋和繁殖機(jī)能的調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S835

【相似文獻(xiàn)】

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