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C.albicans感染中MBL濃度改變以及Treg細(xì)胞的表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2017-05-31 07:15

  本文關(guān)鍵詞:C.albicans感染中MBL濃度改變以及Treg細(xì)胞的表達(dá)分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景白假絲酵母菌(Candida albicans, C. albicans)是臨床上最常見(jiàn)的感染性真菌,甘露聚糖結(jié)合凝集素(mannan-binding lectin, MBL)是由肝細(xì)胞分泌的血漿蛋白,屬于C型凝集素超家族中膠凝素家族成員,是天然免疫系統(tǒng)中一個(gè)關(guān)鍵的可溶性PRR,被稱(chēng)為“天然免疫系統(tǒng)中的關(guān)鍵分子”。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)其表型為CD4+CD25+ Foxp3+,占CD4+T細(xì)胞總數(shù)的5%~15%,是體內(nèi)具有免疫調(diào)節(jié)功能的CD4+T細(xì)胞亞群。我們課題組前期研究證明,MBL對(duì)C.albicans相態(tài)轉(zhuǎn)化及其誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答具有調(diào)節(jié)作用,那么在C.albicans感染患者的血漿中,MBL濃度如何改變?以及Treg細(xì)胞表達(dá)如何變化?二者是否存在相關(guān)性?則需要進(jìn)一步深入研究。該研究將進(jìn)一步揭示MBL在抗C.albicans感染免疫應(yīng)答中的調(diào)節(jié)作用。本研究首先收集臨床上C.albicans感染患者及健康對(duì)照者的外周血液標(biāo)本,進(jìn)一步采用ELISA檢測(cè)血漿中MBL濃度,用流式細(xì)胞術(shù)分析PBMC中Treg細(xì)胞的表達(dá),RT-PCR分析Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá)情況,最后采用ELISA檢測(cè)Treg細(xì)胞炎性因子IL-1β的表達(dá)水平水平。結(jié)果顯示,與健康對(duì)照組相比,C. albicans感染的患者血漿MBL濃度顯著升高,且在C. albicans感染患者PBMC中Treg細(xì)胞的表達(dá)明顯增加,Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá)明顯增強(qiáng),Treg細(xì)胞相關(guān)炎性因子IL-1p水平分泌也同樣升高。上述結(jié)果顯示,在C. albicans感染時(shí),MBL濃度升高,Treg細(xì)胞表達(dá)升高。提示,在C. albicans感染時(shí),MBL濃度的改變與Treg細(xì)胞表達(dá)水平存在相關(guān)性。該研究為臨床C. albicans感染的防治提供新的理論依據(jù)和新的靶點(diǎn)。目的分析C.albicans感染患者血漿MBL濃度的改變以及Treg細(xì)胞表達(dá)的情況。方法1.收集臨床標(biāo)本并檢測(cè)其MBL濃度:按照納入標(biāo)準(zhǔn)收集C. albicans感染患者及健康對(duì)照者外周血液標(biāo)本各20例,ELISA檢測(cè)C.albicans感染患者及健康對(duì)照者外周血MBL水平。2.流式分析Treg細(xì)胞:收集每例血液標(biāo)本,加入FITC-抗CD4和PDC-抗CD25及PE-抗Foxp3單克隆抗體,流式細(xì)胞術(shù)分析Treg細(xì)胞表達(dá)情況。3. ELISA檢測(cè)IL-1β的水平:ELISA檢測(cè)C.albicans感染患者及健康對(duì)照者外周血炎性細(xì)胞因子IL-1p的水平。4. RT-PCR分析Foxp3的表達(dá):RT-PCR分析C.albicans感染組及健康對(duì)照組Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá)情況。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:根據(jù)得出的數(shù)據(jù)資料(x±S)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用SPSS 19.0進(jìn)行分析,多個(gè)樣本均數(shù)比較采用One-way ANOVA檢驗(yàn),以P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)意義。結(jié)果1.20例患者平均MBL血清濃度為1.893μg/ml,20例對(duì)照組平均MBL血清濃度為1.310μg/ml,兩者對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),顯示C.albicans感染的患者血漿MBL濃度顯著升高。2. C.albicans I感染的患者外周血PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+細(xì)胞百分率較健康對(duì)照組有顯著升高(P0.05),提示Treg細(xì)胞數(shù)量在C. albicans感染患者PBMC中的比例增加。3.與健康對(duì)照組相比,C.albicans感染的患者血漿中Treg細(xì)胞炎性因子IL-1β水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),提示C.albicans感染時(shí)Treg細(xì)胞反應(yīng)性增強(qiáng)。4. C.albicans感染的患者Foxp3表達(dá)高于健康對(duì)照組(P0.05),提示Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3在C.albicans感染患者PBMC中的表達(dá)增強(qiáng)。結(jié)論在C.albicans感染時(shí),MBL濃度顯著升高,Treg細(xì)胞的表達(dá)同樣升高。
【關(guān)鍵詞】:甘露聚糖結(jié)合凝集素 白假絲酵母菌 Treg細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R446.1;R519
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 前言10-11
  • 實(shí)驗(yàn)材料11-13
  • 實(shí)驗(yàn)方法13-20
  • 結(jié)果20-23
  • 討論23-26
  • 小結(jié)26-27
  • 參考文獻(xiàn)27-31
  • 綜述:Th17和Treg在白假絲酵母菌免疫中的反應(yīng)31-40
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 附錄40-41
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況41-42
  • 致謝42-43
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷43

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王凡平;王明永;郭曉芳;石如玲;徐素玲;馬淑君;李海斌;郭繼強(qiáng);楊秀麗;;MBL抑制LPS誘導(dǎo)DC成熟機(jī)制的研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2013年03期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王明永;甘露聚糖結(jié)合凝集素調(diào)節(jié)獲得性免疫應(yīng)答的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年


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本文編號(hào):408884

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