C.albicans感染中MBL濃度改變以及Treg細胞的表達分析
發(fā)布時間:2017-05-31 07:15
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【摘要】:背景白假絲酵母菌(Candida albicans, C. albicans)是臨床上最常見的感染性真菌,甘露聚糖結合凝集素(mannan-binding lectin, MBL)是由肝細胞分泌的血漿蛋白,屬于C型凝集素超家族中膠凝素家族成員,是天然免疫系統(tǒng)中一個關鍵的可溶性PRR,被稱為“天然免疫系統(tǒng)中的關鍵分子”。調節(jié)性T細胞(Tregs)其表型為CD4+CD25+ Foxp3+,占CD4+T細胞總數(shù)的5%~15%,是體內具有免疫調節(jié)功能的CD4+T細胞亞群。我們課題組前期研究證明,MBL對C.albicans相態(tài)轉化及其誘導的免疫應答具有調節(jié)作用,那么在C.albicans感染患者的血漿中,MBL濃度如何改變?以及Treg細胞表達如何變化?二者是否存在相關性?則需要進一步深入研究。該研究將進一步揭示MBL在抗C.albicans感染免疫應答中的調節(jié)作用。本研究首先收集臨床上C.albicans感染患者及健康對照者的外周血液標本,進一步采用ELISA檢測血漿中MBL濃度,用流式細胞術分析PBMC中Treg細胞的表達,RT-PCR分析Treg細胞特異性轉錄因子Foxp3的表達情況,最后采用ELISA檢測Treg細胞炎性因子IL-1β的表達水平水平。結果顯示,與健康對照組相比,C. albicans感染的患者血漿MBL濃度顯著升高,且在C. albicans感染患者PBMC中Treg細胞的表達明顯增加,Treg細胞特異性轉錄因子Foxp3的表達明顯增強,Treg細胞相關炎性因子IL-1p水平分泌也同樣升高。上述結果顯示,在C. albicans感染時,MBL濃度升高,Treg細胞表達升高。提示,在C. albicans感染時,MBL濃度的改變與Treg細胞表達水平存在相關性。該研究為臨床C. albicans感染的防治提供新的理論依據(jù)和新的靶點。目的分析C.albicans感染患者血漿MBL濃度的改變以及Treg細胞表達的情況。方法1.收集臨床標本并檢測其MBL濃度:按照納入標準收集C. albicans感染患者及健康對照者外周血液標本各20例,ELISA檢測C.albicans感染患者及健康對照者外周血MBL水平。2.流式分析Treg細胞:收集每例血液標本,加入FITC-抗CD4和PDC-抗CD25及PE-抗Foxp3單克隆抗體,流式細胞術分析Treg細胞表達情況。3. ELISA檢測IL-1β的水平:ELISA檢測C.albicans感染患者及健康對照者外周血炎性細胞因子IL-1p的水平。4. RT-PCR分析Foxp3的表達:RT-PCR分析C.albicans感染組及健康對照組Treg細胞特異性轉錄因子Foxp3的表達情況。5.統(tǒng)計學分析:根據(jù)得出的數(shù)據(jù)資料(x±S)進行統(tǒng)計分析。采用SPSS 19.0進行分析,多個樣本均數(shù)比較采用One-way ANOVA檢驗,以P0.05為差異具有統(tǒng)計意義。結果1.20例患者平均MBL血清濃度為1.893μg/ml,20例對照組平均MBL血清濃度為1.310μg/ml,兩者對比有統(tǒng)計學意義(P0.05),顯示C.albicans感染的患者血漿MBL濃度顯著升高。2. C.albicans I感染的患者外周血PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+細胞百分率較健康對照組有顯著升高(P0.05),提示Treg細胞數(shù)量在C. albicans感染患者PBMC中的比例增加。3.與健康對照組相比,C.albicans感染的患者血漿中Treg細胞炎性因子IL-1β水平明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),提示C.albicans感染時Treg細胞反應性增強。4. C.albicans感染的患者Foxp3表達高于健康對照組(P0.05),提示Treg細胞特異性轉錄因子Foxp3在C.albicans感染患者PBMC中的表達增強。結論在C.albicans感染時,MBL濃度顯著升高,Treg細胞的表達同樣升高。
【關鍵詞】:甘露聚糖結合凝集素 白假絲酵母菌 Treg細胞
【學位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R446.1;R519
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-10
- 前言10-11
- 實驗材料11-13
- 實驗方法13-20
- 結果20-23
- 討論23-26
- 小結26-27
- 參考文獻27-31
- 綜述:Th17和Treg在白假絲酵母菌免疫中的反應31-40
- 參考文獻36-40
- 附錄40-41
- 攻讀學位期間發(fā)表文章情況41-42
- 致謝42-43
- 個人簡歷43
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 王凡平;王明永;郭曉芳;石如玲;徐素玲;馬淑君;李海斌;郭繼強;楊秀麗;;MBL抑制LPS誘導DC成熟機制的研究[J];中國實驗血液學雜志;2013年03期
中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 王明永;甘露聚糖結合凝集素調節(jié)獲得性免疫應答的初步研究[D];南方醫(yī)科大學;2008年
本文關鍵詞:C.albicans感染中MBL濃度改變以及Treg細胞的表達分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:408884
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