水中諾如病毒切向流超濾富集方法的研究
發(fā)布時間:2024-02-27 20:10
目的建立切向流超濾富集法(Pellicon超濾膜第一次富集和PEG第二次富集)用于飲用水中諾如病毒的檢測。方法梯度稀釋含有NoV GⅡ型諾如病毒的糞便,分別加入純水中制成模擬水樣,同時加入MS2標(biāo)準(zhǔn)品作為過程對照,用Pellicon-PEG富集法濃縮后,再用Real-time PCR檢測富集前后的NoV GⅡ病毒和MS2標(biāo)準(zhǔn)品濃度,評估該方法的靈敏度、回收率和抑制指數(shù)。結(jié)果切向流超濾富集法檢測靈敏度為模擬水樣10-4 Copies/μL,平均回收率為10%~20%,抑制指數(shù)均少于2。結(jié)論初步建立大體積水樣諾如病毒的富集檢測方法,為提高水源性諾如病毒胃腸炎疫情暴發(fā)實驗室檢測能力奠定基礎(chǔ)。
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本文編號:3912911
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圖1GⅡ質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線
用100~107Copies/μL的GⅡ質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,以檢測糞便病毒稀釋液NoVGⅡ病毒以及過濾后富集水樣NoVGⅡ病毒的絕對定量。7個點具有良好的線性關(guān)系,斜率為-3.196,相關(guān)系數(shù)R2值為0.999,見圖1。2.1.2Pellicon-PEG富集法富集病....
圖2MS2標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.2.2MS2回收率各稀釋梯度模擬水樣MS2的回收率在10%~20%,各稀釋梯度的平均回收率分別為16.5%、15.7%、12.8%、12.1%、15.3%,見表2。NoVGⅡ的檢測靈敏度是10-4Copies/μL,對表1中糞懸液稀釋梯度大于10-4Copies/μL....
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