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呼吸道合胞病毒對結腸癌的溶瘤作用研究

發(fā)布時間:2017-05-12 08:20

  本文關鍵詞:呼吸道合胞病毒對結腸癌的溶瘤作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:結腸癌作為消化道腫瘤的一種常見疾病,其發(fā)病率在所有惡行腫瘤中排名第三,且呈逐年上升趨勢,發(fā)現(xiàn)和治療結腸癌勢在必行。RSV為單股負鏈RNA病毒,既往研究發(fā)現(xiàn)其對部分腫瘤細胞表現(xiàn)出溶瘤促凋亡效果,但由于同種病毒對不同組織細胞感染力和殺傷力不同,因此本研究旨在探討RSV對結腸癌細胞是否具有溶瘤作用。方法:培養(yǎng)和純化RSV并檢測其滴度,MTT法檢測RSV對結腸癌細胞SW480、HT29及LOVO生長抑制作用,顯微鏡下觀察細胞病變及噬斑法測病毒滴度,Annexin V-FITC/PI雙標法檢測RSV對HT29細胞及SW480和LOVO細胞的凋亡誘導作用,同時結腸癌裸鼠腫瘤模型中觀察瘤內接種RSV后腫瘤體積變化。結果:MTT結果提示:RSV明顯抑制結腸癌細胞SW480及HT29細胞生長,這種抑制作用呈現(xiàn)明顯的劑量及時間依賴性,對人結腸上皮細胞LOVO無抑制作用;接種病毒后SW480及HT29細胞出現(xiàn)不同程度的圓縮、脫落現(xiàn)象,隨接種時間和接種劑量變化,病變愈加顯著,LOVO細胞接種病毒后病變不明顯;RSV病毒能夠在SW480、HT29細胞中有效復制,在LOVO細胞中不能復制;Annexin V-FITC/PI雙標法結果提示:RSV可有效誘導SW480、HT29凋亡,且隨時間延長凋亡細胞增加,對LOVO細胞無促凋亡作用;裸鼠結腸癌模型中,與對照組比較瘤內接種RSV顯示出明顯的腫瘤抑制作用,統(tǒng)計學差異顯著(P0.05)。結論:1.RSV對結腸癌細胞SW480、HT29具有誘導促凋亡作用,對LOVO作用不顯著;2.RSV能在結腸癌細胞SW480、HT29中有效復制,在LOVO中不能有效復制;3.RSV對不同細胞作用效果不同,其具體機制有待進一步探討,提示RSV可能對多數(shù)腫瘤有殺傷作用。
【關鍵詞】:結腸癌 人呼吸道合胞病毒 溶瘤 凋亡
【學位授予單位】:河南科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R735.35;R511
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • ABSTRACT4-8
  • 第1章 緒論8-24
  • 1.1 研究背景8-21
  • 1.1.1 溶瘤病毒及其發(fā)展史8-9
  • 1.1.2 溶瘤病毒的分類9
  • 1.1.3 溶瘤病毒主要作用機制9-11
  • 1.1.4 溶瘤病毒對腫瘤細胞的靶向性11-12
  • 1.1.5 溶瘤病毒的殺傷性12-14
  • 1.1.6 溶瘤病毒研究現(xiàn)狀14-18
  • 1.1.7 技術瓶頸18-19
  • 1.1.8 問題與展望19-21
  • 1.1.9 結語21
  • 1.2 研究目的21
  • 1.3 研究意義21-24
  • 第2章 材料與方法24-33
  • 2.1 實驗材料24-26
  • 2.1.1 細胞系及病毒株24
  • 2.1.2 主要試劑24
  • 2.1.3 主要儀器24-25
  • 2.1.4 主要溶劑配制25-26
  • 2.2 實驗方法26-33
  • 2.2.1 Hep2細胞的培養(yǎng)、傳代及凍存26
  • 2.2.2 病毒擴增培養(yǎng)及純化26-27
  • 2.2.3 病毒滴度檢測27-28
  • 2.2.4 SW480細胞、HT29細胞及LOVO細胞的培養(yǎng)、傳代及凍存28-29
  • 2.2.5 MTT實驗29-30
  • 2.2.6 細胞CPE效應30
  • 2.2.7 病毒復制能力檢測30-31
  • 2.2.8 Annexin V-FITC/PI法檢測細胞凋亡31-32
  • 2.2.9 動物實驗32
  • 2.2.10 統(tǒng)計分析32-33
  • 第3章 結果33-41
  • 3.1 MTT法檢測呼吸道合胞病毒對結腸癌細胞的毒性作用33-34
  • 3.2 病毒CPE效應34-36
  • 3.3 病毒體外復制36-38
  • 3.4 Annexin V-FITC/PI法檢測細胞凋亡38-39
  • 3.5 裸鼠動物實驗結果39-41
  • 第4章 討論41-45
  • 第5章 結論45-46
  • 參考文獻46-50
  • 縮略語詞匯表50-51
  • 致謝51-52
  • 攻讀學位期間的研究成果52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 馬正海;;溶瘤病毒靶向腫瘤的分子機制[J];細胞生物學雜志;2009年06期

2 蘇曉三;張蕾;;細胞荷載溶瘤病毒治療腫瘤的研究進展[J];腫瘤;2011年01期

3 梅贊;朱鳳儀;;干細胞荷載溶瘤病毒治療膠質瘤的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2011年21期


  本文關鍵詞:呼吸道合胞病毒對結腸癌的溶瘤作用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:359275

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