本文關(guān)鍵詞：呼吸道合胞病毒對(duì)結(jié)腸癌的溶瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:結(jié)腸癌作為消化道腫瘤的一種常見(jiàn)疾病,其發(fā)病率在所有惡行腫瘤中排名第三,且呈逐年上升趨勢(shì),發(fā)現(xiàn)和治療結(jié)腸癌勢(shì)在必行。RSV為單股負(fù)鏈RNA病毒,既往研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)部分腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出溶瘤促凋亡效果,但由于同種病毒對(duì)不同組織細(xì)胞感染力和殺傷力不同,因此本研究旨在探討RSV對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞是否具有溶瘤作用。方法:培養(yǎng)和純化RSV并檢測(cè)其滴度,MTT法檢測(cè)RSV對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、HT29及LOVO生長(zhǎng)抑制作用,顯微鏡下觀察細(xì)胞病變及噬斑法測(cè)病毒滴度,Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)法檢測(cè)RSV對(duì)HT29細(xì)胞及SW480和LOVO細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用,同時(shí)結(jié)腸癌裸鼠腫瘤模型中觀察瘤內(nèi)接種RSV后腫瘤體積變化。結(jié)果:MTT結(jié)果提示:RSV明顯抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480及HT29細(xì)胞生長(zhǎng),這種抑制作用呈現(xiàn)明顯的劑量及時(shí)間依賴性,對(duì)人結(jié)腸上皮細(xì)胞LOVO無(wú)抑制作用;接種病毒后SW480及HT29細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的圓縮、脫落現(xiàn)象,隨接種時(shí)間和接種劑量變化,病變愈加顯著,LOVO細(xì)胞接種病毒后病變不明顯;RSV病毒能夠在SW480、HT29細(xì)胞中有效復(fù)制,在LOVO細(xì)胞中不能復(fù)制;Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)法結(jié)果提示:RSV可有效誘導(dǎo)SW480、HT29凋亡,且隨時(shí)間延長(zhǎng)凋亡細(xì)胞增加,對(duì)LOVO細(xì)胞無(wú)促凋亡作用;裸鼠結(jié)腸癌模型中,與對(duì)照組比較瘤內(nèi)接種RSV顯示出明顯的腫瘤抑制作用,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P0.05)。結(jié)論:1.RSV對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、HT29具有誘導(dǎo)促凋亡作用,對(duì)LOVO作用不顯著;2.RSV能在結(jié)腸癌細(xì)胞SW480、HT29中有效復(fù)制,在LOVO中不能有效復(fù)制;3.RSV對(duì)不同細(xì)胞作用效果不同,其具體機(jī)制有待進(jìn)一步探討,提示RSV可能對(duì)多數(shù)腫瘤有殺傷作用。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)腸癌 人呼吸道合胞病毒 溶瘤 凋亡
【學(xué)位授予單位】：河南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.35;R511
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第1章 緒論8-24
• 1.1 研究背景8-21
• 1.1.1 溶瘤病毒及其發(fā)展史8-9
• 1.1.2 溶瘤病毒的分類9
• 1.1.3 溶瘤病毒主要作用機(jī)制9-11
• 1.1.4 溶瘤病毒對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向性11-12
• 1.1.5 溶瘤病毒的殺傷性12-14
• 1.1.6 溶瘤病毒研究現(xiàn)狀14-18
• 1.1.7 技術(shù)瓶頸18-19
• 1.1.8 問(wèn)題與展望19-21
• 1.1.9 結(jié)語(yǔ)21
• 1.2 研究目的21
• 1.3 研究意義21-24
• 第2章 材料與方法24-33
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 2.1.1 細(xì)胞系及病毒株24
• 2.1.2 主要試劑24
• 2.1.3 主要儀器24-25
• 2.1.4 主要溶劑配制25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-33
• 2.2.1 Hep2細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代及凍存26
• 2.2.2 病毒擴(kuò)增培養(yǎng)及純化26-27
• 2.2.3 病毒滴度檢測(cè)27-28
• 2.2.4 SW480細(xì)胞、HT29細(xì)胞及LOVO細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代及凍存28-29
• 2.2.5 MTT實(shí)驗(yàn)29-30
• 2.2.6 細(xì)胞CPE效應(yīng)30
• 2.2.7 病毒復(fù)制能力檢測(cè)30-31
• 2.2.8 Annexin V-FITC/PI法檢測(cè)細(xì)胞凋亡31-32
• 2.2.9 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)32
• 2.2.10 統(tǒng)計(jì)分析32-33
• 第3章 結(jié)果33-41
• 3.1 MTT法檢測(cè)呼吸道合胞病毒對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的毒性作用33-34
• 3.2 病毒CPE效應(yīng)34-36
• 3.3 病毒體外復(fù)制36-38
• 3.4 Annexin V-FITC/PI法檢測(cè)細(xì)胞凋亡38-39
• 3.5 裸鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-41
• 第4章 討論41-45
• 第5章 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 縮略語(yǔ)詞匯表50-51
• 致謝51-52
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 馬正海;;溶瘤病毒靶向腫瘤的分子機(jī)制[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2009年06期

2 蘇曉三;張蕾;;細(xì)胞荷載溶瘤病毒治療腫瘤的研究進(jìn)展[J];腫瘤;2011年01期

3 梅贊;朱鳳儀;;干細(xì)胞荷載溶瘤病毒治療膠質(zhì)瘤的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年21期

  本文關(guān)鍵詞：呼吸道合胞病毒對(duì)結(jié)腸癌的溶瘤作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：359275