本文關(guān)鍵詞：流感疫苗免疫人群血清中抗HA莖部廣譜中和抗體檢測，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：流感是威脅人類健康的常見傳染病之一,主要由流感病毒導(dǎo)致。疫苗接種是目前流感防治的有效方法。流感病毒感染或疫苗接種后,能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生郎向流感病毒抗原的抗體,其中起中和作用的主要是抗血凝素(HA)抗體。流感病毒HA抗原由頭部和莖部構(gòu)成,病毒抗原簇主要集中在頭部。疫苗接種誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體大多針對(duì)HA頭部,對(duì)抗原近似的病毒具有反應(yīng)性,但HA頭部易發(fā)生抗原漂移,因而每年需要更新疫苗姐分。近年來人們分離獲得越來越多的針對(duì)HA莖部的廣譜中和抗體,送類抗體通過抑剌病毒與內(nèi)吞體膜的融合或者抑制HA裂解而發(fā)揮中和作用。由于HA莖部氨基酸相似性在不同亞型流感病毒中相對(duì)較高,抗HA莖部中和抗體具有較廣的抗病毒譜,可抑制不同亞型甚至不同組(Group)流感病毒感染。疫苗接種能否誘導(dǎo)抗HA莖部抗體及血清中這類抗體的含量尚不清楚。本課題檢測了季節(jié)性流感疫苗及2009pdmHlNl疫苗接種的中國人群血清中抗HA莖部抗體水平(免前0天和免后21天)。首先使用A/Bri油ane/59/2007(HlNl)-HA或A/Califomia/04/2009(HlW)-HA抗原,應(yīng)用間接ELISA測定血清抗體對(duì)所接種的同源抗原的反應(yīng),再使用A/Anhui/1/2005(H5N1)-HA測定血清抗體對(duì)不同亞型HA的交叉反應(yīng)性。由于抗HA莖部抗體在血清中的含量極低且血清中還可能存在造成非特異性結(jié)合的其它物質(zhì),我們用protein A進(jìn)行血清純化,之后的實(shí)驗(yàn)均使用純化后血清測試。對(duì)HA交叉結(jié)合性抗體水平明顯增高的樣本W(wǎng)含嵌合姐5/1(由A/Shenzhen/1/2011(H5N1)HA頭部和A/PuertoRico/8/1934(Hl饑)HA莖部構(gòu)成)的CH5N1(SZ)假病毒測定血清抗體中和功能。再WcH5/l(QH)(含CH5/1(QH)HA,即由A/Bar-headed Goose/Qinghai/1/05巧5饑)頭部和A/PuertoRico/8/1934(Hl饑)莖部構(gòu)成,反向遺傳捶救獲得的重組病毒)、A/Brisbane/59/2007(HlNl)、A/Califomia/07/2009(H1W)進(jìn)行HI試驗(yàn)和W生物素標(biāo)記的己知班向Groupl HA莖部的中和抗體CR6261,通過競爭性ELISA檢測,明確了血清抗體的識(shí)別表位。本研究獲得以下主要結(jié)果:一、季節(jié)性流感疫苗免疫人群血清中抗HA莖部廣譜中和抗體水平1、49個(gè)季節(jié)性流感疫苗受試者中,17人血清(34.79%,17/49)同CA04-HA有交叉反應(yīng),其中有11人(64.71%,11/17)血清也能同AH1-HA(H5)反應(yīng)。2、17份交叉反應(yīng)的血清中7份在免后21天對(duì)CH5N1(SZ)pps具有交叉反應(yīng)中和活性;3人免前血清中可檢測到抗HA莖部的CR6261類似抗體;疫苗接種后,均能檢測到CR6261類似抗體,且該類抗體水平明顯X椄

本文編號(hào)：338055