本文選題：HIV-假病毒　切入點：未成熟樹突狀細胞　出處：《中國免疫學雜志》2017年10期

【摘要】：目的:構建攜帶增強型綠色熒光蛋白基因(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的HIV-1假病毒;通過HIV-1假病毒感染未成熟樹突狀細胞(immatural dendritic cell,iDC)實驗探討病毒與細胞的相互作用。方法:利用慢病毒包裝系統(tǒng)構建攜帶EGFP基因的HIV-1假病毒,通過RT-PCR擴增HIV-1假病毒中的EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC,對HIV-1假病毒感染iDC后的基因組整合和轉錄水平進行檢測,觀察被感染iDC中EGFP基因的表達。結果:構建的HIV-1假病毒通過RT-PCR結果顯示擴增得到EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC后,在基因組整合和轉錄水平檢測中都擴增得到了EGFP基因,熒光顯微鏡觀察被HIV-1假病毒感染的iDC,觀察到iDC表達綠色熒光蛋白。結論:成功構建攜帶EGFP基因的HIV-1假病毒;HIV-1假病毒可以感染iDC,并將其遺傳物質整合到iDC基因組中,并經(jīng)過轉錄和翻譯使iDC表達EGFP。
[Abstract]:Aim: to construct HIV-1 pseudovirus carrying enhanced green fluorescent protein (EGFP) and to investigate the interaction between HIV-1 pseudovirus and immature dendritic cells infected with HIV-1 pseudovirus.Methods: HIV-1 pseudoviruses carrying EGFP gene were constructed by using lentivirus packaging system. The EGFP gene of HIV-1 pseudovirus was amplified by RT-PCR and infected with HIV-1 pseudovirus. The genomic integration and transcription level of HIV-1 pseudovirus infected with iDC were detected.To observe the expression of EGFP gene in infected iDC.Results: the constructed HIV-1 pseudovirus was amplified by RT-PCR, and the EGFP gene was amplified by the amplification of EGFP gene and HIV-1 pseudovirus infected with iDC in both genomic integration and transcriptional level detection.The expression of green fluorescent protein (GFP) was observed by fluorescence microscope in iDC infected by HIV-1 pseudovirus.Conclusion: HIV-1 pseudovirus carrying EGFP gene can infect iDCand integrate its genetic material into iDC genome, and iDC can express EGFP by transcription and translation.
【作者單位】： 青島市中心醫(yī)院藥學部;暨南大學第二臨床醫(yī)院 深圳市人民醫(yī)院;長春中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院;軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所 省部共建吉林省人獸共患病預防與控制重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金(31472197) 病原微生物生物安全國家重點實驗室開放課題(SKLPBS1435) 北京市自然科學基金(5152023) 吉林省青年科研基金項目(20140520173JH)資助
【分類號】：R512.91

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本文編號：1719476