HIV-1假病毒感染未成熟樹突狀細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究
本文選題:HIV-假病毒 切入點(diǎn):未成熟樹突狀細(xì)胞 出處:《中國免疫學(xué)雜志》2017年10期
【摘要】:目的:構(gòu)建攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的HIV-1假病毒;通過HIV-1假病毒感染未成熟樹突狀細(xì)胞(immatural dendritic cell,iDC)實(shí)驗(yàn)探討病毒與細(xì)胞的相互作用。方法:利用慢病毒包裝系統(tǒng)構(gòu)建攜帶EGFP基因的HIV-1假病毒,通過RT-PCR擴(kuò)增HIV-1假病毒中的EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC,對(duì)HIV-1假病毒感染iDC后的基因組整合和轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行檢測(cè),觀察被感染iDC中EGFP基因的表達(dá)。結(jié)果:構(gòu)建的HIV-1假病毒通過RT-PCR結(jié)果顯示擴(kuò)增得到EGFP基因;HIV-1假病毒感染iDC后,在基因組整合和轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)中都擴(kuò)增得到了EGFP基因,熒光顯微鏡觀察被HIV-1假病毒感染的iDC,觀察到iDC表達(dá)綠色熒光蛋白。結(jié)論:成功構(gòu)建攜帶EGFP基因的HIV-1假病毒;HIV-1假病毒可以感染iDC,并將其遺傳物質(zhì)整合到iDC基因組中,并經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯使iDC表達(dá)EGFP。
[Abstract]:Aim: to construct HIV-1 pseudovirus carrying enhanced green fluorescent protein (EGFP) and to investigate the interaction between HIV-1 pseudovirus and immature dendritic cells infected with HIV-1 pseudovirus.Methods: HIV-1 pseudoviruses carrying EGFP gene were constructed by using lentivirus packaging system. The EGFP gene of HIV-1 pseudovirus was amplified by RT-PCR and infected with HIV-1 pseudovirus. The genomic integration and transcription level of HIV-1 pseudovirus infected with iDC were detected.To observe the expression of EGFP gene in infected iDC.Results: the constructed HIV-1 pseudovirus was amplified by RT-PCR, and the EGFP gene was amplified by the amplification of EGFP gene and HIV-1 pseudovirus infected with iDC in both genomic integration and transcriptional level detection.The expression of green fluorescent protein (GFP) was observed by fluorescence microscope in iDC infected by HIV-1 pseudovirus.Conclusion: HIV-1 pseudovirus carrying EGFP gene can infect iDCand integrate its genetic material into iDC genome, and iDC can express EGFP by transcription and translation.
【作者單位】: 青島市中心醫(yī)院藥學(xué)部;暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)院 深圳市人民醫(yī)院;長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所 省部共建吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31472197) 病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(SKLPBS1435) 北京市自然科學(xué)基金(5152023) 吉林省青年科研基金項(xiàng)目(20140520173JH)資助
【分類號(hào)】:R512.91
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10 鐘曉e,
本文編號(hào):1719476
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