本文關(guān)鍵詞：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在不同培養(yǎng)體系條件下的生物學(xué)特性

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【摘要】：背景:體外培養(yǎng)的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在不同培養(yǎng)體系下生長狀態(tài)差異顯著,因此選取一種更適合的培養(yǎng)基相當(dāng)必要。目的:對(duì)比觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在3種培養(yǎng)基中的生長增殖情況,并檢測細(xì)胞免疫表型以及間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化能力。方法:在無菌條件下用貼塊法收獲人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,用T75培養(yǎng)瓶培養(yǎng)傳代后,取第3代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分別種入到含體積分?jǐn)?shù)為5%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基、含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基和Mesen PRO RSTM培養(yǎng)基中,培養(yǎng)第1,3,5,7天進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),繪制細(xì)胞生長曲線。采用流式細(xì)胞儀分析第3代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞免疫表型,并檢測其成骨及成脂肪誘導(dǎo)分化能力。結(jié)果與結(jié)論:培養(yǎng)出的第3代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞高表達(dá)CD44、CD73、CD90、CD105,不表達(dá)CD29、CD31、CD34、HLA-DR。經(jīng)成脂誘導(dǎo)后,油紅O染色可見胞漿中有大量紅色小脂滴;成骨誘導(dǎo)后,茜素紅染色后鏡下可見成骨樣細(xì)胞團(tuán),說明臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在體外具有多向分化的潛能。在倒置顯微鏡下觀察可見含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基中的細(xì)胞集落密集,形態(tài)均勻,而其他2種培養(yǎng)基中的細(xì)胞集落密集程度和形態(tài)都不如前者好。在培養(yǎng)傳代細(xì)胞時(shí),可優(yōu)先選擇含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
【作者單位】： 協(xié)和干細(xì)胞基因工程有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 臍帶 間質(zhì)干細(xì)胞 培養(yǎng)基 臍帶臍血干細(xì)胞 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 誘導(dǎo)分化
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 文章亮點(diǎn):1利用組織塊貼壁法成功獲得貼壁生長的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,并在體外擴(kuò)增傳代培養(yǎng)。2用含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基、含體積分?jǐn)?shù)5%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基、MesenPRO RSTM培養(yǎng)基培養(yǎng)同一代次臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,結(jié)果顯示含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DMEM/F12

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