本文關(guān)鍵詞：不同溫度下體外大鼠睪丸支持細(xì)胞膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長因子的表達(dá)

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【摘要】：目的:通過觀察不同溫度下體外大鼠睪丸支持細(xì)胞(Sertoli cell,SC)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長因子(GDNF)表達(dá)特點(diǎn),探討高溫致不育的機(jī)制。方法:采用組合酶消化法和選擇性貼壁法分離雄性Wistar大鼠睪丸SC,將分離的SC分別置于不同溫度進(jìn)行體外培養(yǎng),觀察其貼壁、形態(tài)學(xué)變化,FasL免疫組化鑒定。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(35℃)、實(shí)驗(yàn)組(36℃、37℃、38℃、39℃)。CCK-8法檢測SC增殖情況,HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu),RTPCR、免疫熒光及Western印跡檢測細(xì)胞GDNF的表達(dá)。結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)條件下,體外分離培養(yǎng)SC純度=(95.30±2.15)%(n=10),CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,36℃時(shí)細(xì)胞增殖率最高(P0.01),36℃時(shí),隨著溫度的提高,增殖率逐漸降低,39℃對(duì)細(xì)胞增殖具有明顯抑制作用(P0.01);免疫熒光結(jié)果顯示,GDNF表達(dá)于SC胞質(zhì),36℃時(shí)熒光最強(qiáng),RT-PCR及Western印跡檢測結(jié)果顯示,高于36℃時(shí),GDNF mRNA及蛋白的表達(dá)隨著溫度的增加而降低,36℃、37℃、38℃、39℃4組與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:不同溫度下,體外培養(yǎng)SC的增殖能力和GDNF表達(dá)明顯不同。36℃時(shí),隨著溫度的提高,增殖能力受到抑制,GDNF表達(dá)水平顯著降低。本研究結(jié)果證實(shí),高溫下大鼠睪丸SC正常功能受到抑制,從而影響生精功能。
【作者單位】： 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院低溫醫(yī)學(xué)科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 溫度 支持細(xì)胞 膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長因子 大鼠
【分類號(hào)】：R321
【正文快照】： 精子發(fā)生是一個(gè)精細(xì)的調(diào)節(jié)過程,對(duì)多種刺激因素敏感,熱作用是其中之一。生理?xiàng)l件下,睪丸的局部溫度一般較腹腔內(nèi)低2~8℃[1],適宜的溫度對(duì)精子發(fā)生是必不可少的,暴露在體溫或高于體溫的情況下可導(dǎo)致生精障礙。睪丸支持細(xì)胞(Sertolicell,SC)為生精細(xì)胞提供結(jié)構(gòu)支持與營養(yǎng)供給,溫

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：906691