本文關(guān)鍵詞：A、C、Y、W135群腦膜炎奈瑟菌血清抗體特異性體外殺菌試驗(yàn)方法的建立及其驗(yàn)證

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【摘要】：目的建立A、C、W135和Y群腦膜炎奈瑟菌血清抗體特異性體外殺菌試驗(yàn)方法 (serum bactericidal assay,SBA),并進(jìn)行驗(yàn)證。方法對SBA中活菌收獲時間、靶菌的制備、反應(yīng)時間及補(bǔ)體進(jìn)行優(yōu)化,并確定質(zhì)控血清Men10的質(zhì)控范圍。對優(yōu)化后的方法進(jìn)行特異性、線性、精密度驗(yàn)證。結(jié)果確定A600值為0.5~0.8時為收獲細(xì)菌最佳收獲時間;凍存菌種可替代新鮮制備菌種作為靶菌;最佳殺菌反應(yīng)時間為60 min;17830和84321N批補(bǔ)體均可用于試驗(yàn)。質(zhì)控血清Men10的質(zhì)控范圍A群為521~4 689,C群為1 047~9 423,W135群為1 779~16 008,Y群為1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清樣品后能夠抑制≥80%的同群SBA滴度,而異群多糖則20%;血清樣品稀釋倍數(shù)與對應(yīng)的SBA滴度呈顯著負(fù)相關(guān),斜率在-0.90~-1.10之間,Pearson相關(guān)系數(shù)在0.90~1.0之間,P均0.001;同一實(shí)驗(yàn)內(nèi)相同樣品檢測結(jié)果 CV≤25%,實(shí)驗(yàn)間相同樣品的95%的檢測結(jié)果落在檢測值中位數(shù)3倍(一個稀釋度)的范圍內(nèi),CV≤40%,不同實(shí)驗(yàn)室間相同樣品的檢測結(jié)果至少有70%落在美國CDC公布結(jié)果的3倍(一個稀釋度)范圍內(nèi)。結(jié)論建立了標(biāo)準(zhǔn)化的具國際間可比性的A、C、W135和Y群腦膜炎奈瑟菌SBA,該方法特異性、線性和精密度良好。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司甘肅省疫苗工程技術(shù)研究中心;美國阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校病理系NIH細(xì)菌性呼吸道病原參考實(shí)驗(yàn)室;中國食品藥品檢定研究院;中國生物技術(shù)集團(tuán)公司;
【關(guān)鍵詞】： 血清抗體殺菌試驗(yàn) 腦膜炎奈瑟菌
【基金】：國家科技支撐計(jì)劃(2008BAI66B01)資助
【分類號】：R378.15;R392-33
【正文快照】： 腦膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)是世界范圍內(nèi)引起兒童腦脊髓膜炎和敗血癥等嚴(yán)重疾病的主要病原菌[1]�；颊卟粌H病死率高,且后遺癥嚴(yán)重[2]。依據(jù)莢膜多糖的組成成分和抗原性差異,將奈瑟腦膜炎鏈球菌分為13個血清群,A、B、C、W135、X和Y6個血清群是主要的致病群。預(yù)防腦

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