骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響
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【摘要】:目的探討原代小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)的培養(yǎng)方法及骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)對(duì)NSCs增殖和分化的影響。方法采用機(jī)械吹打結(jié)合尼龍膜濾過的方法,從胚胎12.5 d的S129小鼠大腦分離NSCs并培養(yǎng);用巢蛋白(nestin)免疫熒光染色鑒定NSCs;將NSCs分為對(duì)照組和BMP-2處理組(BMP-2終濃度10 ng/mL),培養(yǎng)后進(jìn)行BrdU染色和微管相關(guān)蛋白2(MAP2)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色。結(jié)果①鏡下觀察原代培養(yǎng)的NSCs,胞體圓形,單個(gè)或成對(duì)存在,3~5 d后形成神經(jīng)球,神經(jīng)球90%以上細(xì)胞為nestin陽(yáng)性,臺(tái)盼藍(lán)染色表明活細(xì)胞數(shù)大于95%。②BMP-2處理組BrdU陽(yáng)性細(xì)胞比率明顯低于對(duì)照組(P0.05)。③BMP-2處理組MAP2陽(yáng)性細(xì)胞比率顯著低于對(duì)照組(P0.05),而GFAP陽(yáng)性細(xì)胞比率顯著高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論①運(yùn)用機(jī)械吹打結(jié)合尼龍膜濾過的方法可以得到存活率高的原代NSCs;②10 ng/mL BMP-2可抑制NSCs增殖及其向神經(jīng)元方向分化,促進(jìn)其向神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞方向分化。
【作者單位】: 上海交通大學(xué)Bio-X研究院;
【關(guān)鍵詞】: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白- 神經(jīng)干細(xì)胞 增殖 分化 小鼠
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)是指能自我更新,可分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞,并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群[1]。1992年,Reynolds等[2]首次從成年小鼠大腦中分離得到了能在體外不斷分裂增殖、具有多種分化潛能的細(xì)胞群。目前普遍認(rèn)可巢蛋白(nestin)
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,本文編號(hào):881255
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