本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞

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【摘要】：背景:基因治療已成為疾病治療的新趨勢(shì),為某些難治性疾病帶來(lái)了曙光,合適的細(xì)胞、基因及載體的選擇是治療的關(guān)鍵。目的:探討慢病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞應(yīng)用于基因治療的有效性和可行性。方法:從SD大鼠骨髓分離、培養(yǎng)、鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞,采用構(gòu)建的慢病毒載體(LV)將空載體(LV-eGFP)或骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因(LV-eGFP-BMP2)轉(zhuǎn)染至內(nèi)皮祖細(xì)胞,通過(guò)eGFP熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。ELISA法檢測(cè)上清液中骨形態(tài)發(fā)生蛋白2蛋白的分泌,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2蛋白的表達(dá),比較轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的遷移、增殖和抗凋亡能力。結(jié)果與結(jié)論:慢病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2載體的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)90%。與正常內(nèi)皮祖細(xì)胞、轉(zhuǎn)染空載體內(nèi)皮祖細(xì)胞比較,轉(zhuǎn)染骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因的內(nèi)皮祖細(xì)胞分泌和表達(dá)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2蛋白增加(P0.01),遷移和增殖能力無(wú)明顯改變(P0.05),腫瘤壞死因子α損傷后的細(xì)胞凋亡率明顯降低(P0.05)。結(jié)果表明慢病毒介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2載體可成功轉(zhuǎn)染內(nèi)皮祖細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后可增加內(nèi)皮祖細(xì)胞分泌和表達(dá)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2蛋白,增強(qiáng)對(duì)炎性損傷的抗凋亡能力,對(duì)遷移能力和增殖活性無(wú)明顯影響。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 內(nèi)皮細(xì)胞 骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類 慢病毒屬 轉(zhuǎn)染 干細(xì)胞 培養(yǎng) 內(nèi)皮祖細(xì)胞 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 慢病毒載體 基因轉(zhuǎn)染 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助(81071530)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 文章亮點(diǎn):1實(shí)驗(yàn)將修復(fù)內(nèi)皮損傷的內(nèi)皮祖細(xì)胞、調(diào)控干細(xì)胞功能的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因和新興的慢病毒載體三者相結(jié)合,完成了慢病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮祖細(xì)胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染,為相關(guān)疾病的基因治療提供了新的工具。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染可增強(qiáng)內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)炎性損

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬真勝,胡蘊(yùn)玉,呂榮,趙多祿,張傳山;骨形態(tài)發(fā)生蛋白在閉合性骨折愈合外骨痂形成中的作用人──免疫組化研究[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1996年04期

2 余家闊，曲綿域，田得祥，王健全，張美榮，宋衛(wèi)明，劉燕，，李文;載體對(duì)haMp活性影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華外科雜志;1996年10期

3 ;骨及骨骼生理學(xué)[J];國(guó)外科技資料目錄(醫(yī)藥衛(wèi)生);1999年04期

4 蔣雷生;;吸附于羥基磷灰石的骨形態(tài)發(fā)生蛋白的骨膜下植入[J];國(guó)際骨科學(xué)雜志;1992年01期

5 李雙良;骨形態(tài)發(fā)生蛋白研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志;1996年04期

6 原野,張明偉,于曉Y

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