本文關(guān)鍵詞：豬鏈球菌2型中國強毒株05ZYH33 ofs基因敲除突變株構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究

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【摘要】：目的探究豬鏈球菌血清渾濁因子ofs基因在強致病性2型豬鏈球菌致病過程中的作用。方法利用同源重組基因敲除方法構(gòu)建中間為壯觀霉素抗性基因,兩側(cè)為ofs編碼基因上、下游同源序列的基因敲除質(zhì)粒,將構(gòu)建好的質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化入豬鏈球菌感受態(tài),同源重組篩選ofs基因敲除突變株,通過組合PCR、Southern雜交和DNA測序?qū)σ伤仆蛔冎赀M行驗證。生物學(xué)功能實驗研究比較ofs突變株和野生株05ZYH33在革蘭氏染色、菌落溶血活性、生長速率和毒力等方面的差異。結(jié)果組合PCR、Southern雜交和DNA測序結(jié)果均證實ofs基因敲除突變株05ZYH33Δofs構(gòu)建成功,體外實驗結(jié)果顯示ofs基因缺失后菌株在革蘭氏染色和菌落溶血活性及形態(tài)、生長速率等方面未發(fā)生改變,但小鼠毒力實驗數(shù)據(jù)結(jié)果表明敲除突變株Δofs的毒力降低。結(jié)論豬鏈球菌2型ofs基因與細菌的毒力相關(guān),本實驗構(gòu)建的突變株05ZYH33Δofs為進一步研究豬鏈球菌2型的致病機理奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 溫州醫(yī)學(xué)院檢驗醫(yī)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 豬鏈球菌型 ofs 基因敲除 生物特性 毒力
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81172794;No.81071317;No.31170124;No.81171527) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項目(No.BK2011098;No.BK2011097) 南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題(ZX39)資助~~
【分類號】：R378.1
【正文快照】： 豬鏈球菌2型(Streptococcus suis 2,S.suis 2)是一種危害全球的人獸共患病病原菌。該病原菌不僅可致豬腦膜炎、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、肺炎及心內(nèi)膜炎等,而且還可感染人,給相關(guān)從業(yè)者和廣大群眾的生命安全造成嚴(yán)重威脅[1-2]。但目前S.suis 2致病的具體機制仍不清楚。對于豬鏈球菌毒

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本文編號：856255