豬鏈球菌2型中國(guó)強(qiáng)毒株05ZYH33 ofs基因敲除突變株構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究
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【摘要】:目的探究豬鏈球菌血清渾濁因子ofs基因在強(qiáng)致病性2型豬鏈球菌致病過(guò)程中的作用。方法利用同源重組基因敲除方法構(gòu)建中間為壯觀霉素抗性基因,兩側(cè)為ofs編碼基因上、下游同源序列的基因敲除質(zhì)粒,將構(gòu)建好的質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化入豬鏈球菌感受態(tài),同源重組篩選ofs基因敲除突變株,通過(guò)組合PCR、Southern雜交和DNA測(cè)序?qū)σ伤仆蛔冎赀M(jìn)行驗(yàn)證。生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)研究比較ofs突變株和野生株05ZYH33在革蘭氏染色、菌落溶血活性、生長(zhǎng)速率和毒力等方面的差異。結(jié)果組合PCR、Southern雜交和DNA測(cè)序結(jié)果均證實(shí)ofs基因敲除突變株05ZYH33Δofs構(gòu)建成功,體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ofs基因缺失后菌株在革蘭氏染色和菌落溶血活性及形態(tài)、生長(zhǎng)速率等方面未發(fā)生改變,但小鼠毒力實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果表明敲除突變株Δofs的毒力降低。結(jié)論豬鏈球菌2型ofs基因與細(xì)菌的毒力相關(guān),本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的突變株05ZYH33Δofs為進(jìn)一步研究豬鏈球菌2型的致病機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 溫州醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 豬鏈球菌型 ofs 基因敲除 生物特性 毒力
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81172794;No.81071317;No.31170124;No.81171527) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.BK2011098;No.BK2011097) 南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題(ZX39)資助~~
【分類號(hào)】:R378.1
【正文快照】: 豬鏈球菌2型(Streptococcus suis 2,S.suis 2)是一種危害全球的人獸共患病病原菌。該病原菌不僅可致豬腦膜炎、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、肺炎及心內(nèi)膜炎等,而且還可感染人,給相關(guān)從業(yè)者和廣大群眾的生命安全造成嚴(yán)重威脅[1-2]。但目前S.suis 2致病的具體機(jī)制仍不清楚。對(duì)于豬鏈球菌毒
【參考文獻(xiàn)】
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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 喬建軍;馬彥;萬(wàn)U,
本文編號(hào):856255
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