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SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及5-氮胞苷對(duì)其的誘導(dǎo)分化作用

發(fā)布時(shí)間:2017-09-15 01:19

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【摘要】:目的探討SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(SD-MSCs)體外分離的方法條件、生物學(xué)特性及5-氮胞苷對(duì)其的誘導(dǎo)分化作用。方法采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)SD-MSCs,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察.繪制生長(zhǎng)曲線,流式細(xì)胞儀對(duì)其細(xì)胞周期進(jìn)行分析,并通過(guò)成脂肪誘導(dǎo)鑒定,給予5-氮胞苷進(jìn)行誘導(dǎo)分化。通過(guò)免疫組化和蛋白免疫印跡法,觀察其對(duì)超極化激活環(huán)核苷酸門(mén)控的通道蛋白(HCN_2)表達(dá)情況。結(jié)果 SD-MSCs以長(zhǎng)梭形和多角形為主,呈放射狀集落生長(zhǎng).細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈S形,增殖能力比較活躍。成脂肪誘導(dǎo)后,細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有大量橙紅色脂滴形成。不同濃度的5-氮胞苷對(duì)SD-MSCs進(jìn)行誘導(dǎo)分化后,7.5、10、12.5μmol/L5-氮胞苷誘導(dǎo)的HCN_2表達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度較高,其中10μmol/L的5-氮胞苷誘導(dǎo)24h的SD-MSCs HCN_2表達(dá)強(qiáng)度最高。結(jié)論全骨髓貼壁法能夠有效分離純化增殖SD-MSCs,5-氮胞苷能夠誘導(dǎo)其分化為HCN_2表達(dá)陽(yáng)性的細(xì)胞。
【作者單位】: 浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院;浙江綠城心血管病醫(yī)院;浙江醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 全骨髓貼壁法 -氮胞苷
【基金】:浙江省高層次創(chuàng)新人才培養(yǎng)項(xiàng)目(02099)
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【正文快照】: 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一類(lèi)存在于骨髓中的干細(xì)胞,它不僅可以為造血干細(xì)胞(HSC)提供基質(zhì)環(huán)境促進(jìn)HSC增殖,而且也可以在體內(nèi)外適當(dāng)?shù)拇碳は抡T導(dǎo)分化成不同類(lèi)型的細(xì)胞叭5-氮胞苷可以降低細(xì)胞DNA的甲基化水平,進(jìn)而與MSCs向心肌細(xì)胞分化的特異啟動(dòng)基因上的阻遏蛋白相結(jié)合|21,有

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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2 鄧麗群;沈法榮;金紅峰;王歡;;SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及5-氮胞苷對(duì)其的誘導(dǎo)分化作用[J];浙江醫(yī)學(xué);2014年06期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 戴旭鋒;林冰;李英姿;劉曉玲;;正常SD大鼠暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖及光強(qiáng)-反應(yīng)函數(shù)的研究[A];2006年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

4 路浩;張浩;趙寶玉;韋冬梅;王占新;宋巖巖;;氯化汞對(duì)SD大鼠血液生理生化指標(biāo)的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物毒物學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

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8 皮斯妮;譚孟群;;不同年齡SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2013年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 喬婧;青春期重復(fù)使用非典型抗精神病藥對(duì)SD大鼠藥物敏感性及心理功能的短期和長(zhǎng)期影響[D];西南大學(xué);2015年

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7 鹿楠;SD大鼠腰2移位修復(fù)骶叢撕脫傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 萬(wàn)煒;暗飼養(yǎng)對(duì)視神經(jīng)橫斷SD大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)層局部環(huán)路的影響[D];中南大學(xué);2013年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 顧國(guó)曉;早期嗅覺(jué)剝奪對(duì)SD大鼠海馬的影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 郭志剛;姜黃素對(duì)博來(lái)霉素致SD大鼠急性肺損傷中TNF-α和ICAM-1表達(dá)的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

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