發(fā)布時間：2017-09-15 01:19

  本文關鍵詞：SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離及5-氮胞苷對其的誘導分化作用

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【摘要】：目的探討SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(SD-MSCs)體外分離的方法條件、生物學特性及5-氮胞苷對其的誘導分化作用。方法采用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)SD-MSCs,進行形態(tài)學觀察.繪制生長曲線,流式細胞儀對其細胞周期進行分析,并通過成脂肪誘導鑒定,給予5-氮胞苷進行誘導分化。通過免疫組化和蛋白免疫印跡法,觀察其對超極化激活環(huán)核苷酸門控的通道蛋白(HCN_2)表達情況。結(jié)果 SD-MSCs以長梭形和多角形為主,呈放射狀集落生長.細胞生長曲線呈S形,增殖能力比較活躍。成脂肪誘導后,細胞胞質(zhì)內(nèi)有大量橙紅色脂滴形成。不同濃度的5-氮胞苷對SD-MSCs進行誘導分化后,7.5、10、12.5μmol/L5-氮胞苷誘導的HCN_2表達陽性強度較高,其中10μmol/L的5-氮胞苷誘導24h的SD-MSCs HCN_2表達強度最高。結(jié)論全骨髓貼壁法能夠有效分離純化增殖SD-MSCs,5-氮胞苷能夠誘導其分化為HCN_2表達陽性的細胞。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院;浙江綠城心血管病醫(yī)院;浙江醫(yī)院;
【關鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細胞 全骨髓貼壁法 -氮胞苷
【基金】：浙江省高層次創(chuàng)新人才培養(yǎng)項目(02099)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)是一類存在于骨髓中的干細胞,它不僅可以為造血干細胞(HSC)提供基質(zhì)環(huán)境促進HSC增殖,而且也可以在體內(nèi)外適當?shù)拇碳は抡T導分化成不同類型的細胞叭5-氮胞苷可以降低細胞DNA的甲基化水平,進而與MSCs向心肌細胞分化的特異啟動基因上的阻遏蛋白相結(jié)合|21,有

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