本文關(guān)鍵詞：三種人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定及表面抗原表達(dá)比較

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【摘要】：目的探索建立穩(wěn)定有效的原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)體外培養(yǎng)方法,并比較原代HUVECs與HUVEC-CS、EA.hy926細(xì)胞株之間的表面抗原表達(dá)情況。方法Ⅱ型膠原酶消化人臍靜脈分離HUVEC,M199完全培養(yǎng)液培養(yǎng),HUVEC-CS及EA.hy926用DMEM完全培養(yǎng)液。胰蛋白酶消化傳代,對三種細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,流式細(xì)胞儀分析比較表面抗原的表達(dá)率。結(jié)果原代HUVECs細(xì)胞為多角形,"鋪路石樣"排列;HUVEC-CS和EA.hy926細(xì)胞為圓形或扁平形,生長速度快,呈典型"鵝卵石狀排列。v WF因子免疫熒光染色:原代HUVECs及EA.hy926大部分細(xì)胞內(nèi)可見綠色熒光,而HUVEC-CS為陰性。流式細(xì)胞儀分析原代HUVECs(77.7%)或EA.hy926(78.6%)CD31表達(dá)率明顯高于HUVEC-CS(4.2%),原代HUVECs CD34表達(dá)率(43.3%)明顯高于HUVEC-CS或EA.hy926(分別為1.6%、0.2%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論臍靜脈灌注Ⅱ型膠原酶消化法配合M199完全培養(yǎng)液可獲得高純度的內(nèi)皮細(xì)胞,EA.hy926永生細(xì)胞株培養(yǎng)方法簡單,短時(shí)間內(nèi)可獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,兩者均是組織工程及相關(guān)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究較好的細(xì)胞來源。
【作者單位】： 云南省第一人民醫(yī)院口腔內(nèi)科;昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞株 細(xì)胞培養(yǎng) 表面抗原表達(dá)
【分類號】：R329
【正文快照】： 血管和神經(jīng)的分化與新生對于損傷口腔黏膜的再生修復(fù)至關(guān)重要,口腔黏膜損傷時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞可分泌血管生成因子以促進(jìn)損傷黏膜的局部愈合,內(nèi)皮細(xì)胞的損傷也可能參與了人口腔黏膜干細(xì)胞的遷移和分化過程[1-2]。血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離和培養(yǎng)對于了解正常血管新生和血管病理生理等過程起

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本文編號：835288