本文關(guān)鍵詞：人巨細(xì)胞病毒PP65抗原ELISA檢測方法的建立

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【摘要】：目的用制備好的兔和大鼠PP65多克隆抗體建立檢測人巨細(xì)胞病毒PP65抗原的ELISA方法。方法優(yōu)化ELISA檢測條件,建立檢測PP65抗原的標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定檢測方法的精密度及檢出下限。通過對101份臨床疑似HCMV感染標(biāo)本的檢測,并與HCMV-IgM(ELISA)以及HCMV-DNA(FQ-PCR)檢測結(jié)果的比較,分析了該方法的敏感性和特異性。分別檢測HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染血標(biāo)本各5份,分析該方法是否非特異結(jié)合皰疹病毒科其他病毒抗原。結(jié)果以1∶2 000大鼠pAb包被酶標(biāo)板,以1∶20 000兔pAb為檢測一抗,建立了檢測PP65抗原血癥的ELISA方法。批間精密度與批內(nèi)精密度均小于10%,檢出下限為5 ng/ml。本方法檢測的敏感性和特異性與HCMV-DNA(FQ-PCR)無差別(P0.05),但敏感性高于HCMV-IgM(ELISA)方法(P0.05)。對HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染標(biāo)本的檢測結(jié)果均為陰性,排除了該方法非特異結(jié)合皰疹病毒科其他病毒抗原的可能。結(jié)論建立了檢測PP65抗原血癥的間接雙抗夾心ELISA方法,該方法具有較好的敏感性、特異性、穩(wěn)定性和重復(fù)性。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)微生物與免疫教研室;
【關(guān)鍵詞】： 人巨細(xì)胞病毒 PP ELISA 多克隆抗體
【基金】：山西省科技開發(fā)基金資助項(xiàng)目(033068)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 人類巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)屬皰疹病毒科β屬雙鏈DNA病毒。HCMV在人群中感染非常普遍,正常成人HCMV抗體陽性率為76.7%~95.8%[1]。初次感染后病毒大多潛伏體內(nèi),但在艾滋病、器官移植、惡性腫瘤等免疫功能減弱或受抑制的人群中潛伏病毒可繼發(fā)感染引起嚴(yán)重并發(fā)

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