發(fā)布時間：2017-09-08 06:41

  本文關鍵詞：小鼠附睪脂肪干細胞的分離培養(yǎng)及鑒定

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【摘要】：背景:脂肪干細胞作為一種新的成體干細胞,具有來源豐富、取材容易、增殖能力強等優(yōu)點,受到人們越來越多地關注。目的:體外分離培養(yǎng)小鼠附睪脂肪組織中的脂肪干細胞,并鑒定其生物學特性。方法:無菌切取小鼠附睪處脂肪組織,采用膠原酶進行消化,利用1次消化多次收集與差速貼壁法分離純化脂肪干細胞。倒置顯微鏡及透射電子顯微鏡觀察脂肪干細胞的形態(tài)。繪制脂肪干細胞的生長曲線。流式細胞術檢測脂肪干細胞的免疫表型。加入細胞誘導劑對脂肪干細胞進行成骨及成脂肪的誘導分化。掃描電子顯微鏡觀察脂肪干細胞與膠原支架材料的相容性。結果與結論:倒置顯微鏡下可見脂肪干細胞呈長梭形或成纖維細胞樣,密集排列成漩渦狀或成束狀交織,可在體外穩(wěn)定傳至第9代。透射電子顯微鏡下可見脂肪干細胞表面有豐富的微絨毛結構,細胞核體積大,細胞質內可見線粒體、粗面內質網(wǎng)等細胞器。脂肪干細胞表達CD44、CD29,不表達CD34。經(jīng)成脂肪誘導劑誘導后,多數(shù)脂肪干細胞胞質內可見小脂滴,油紅O染色可將小脂滴染成紅色。經(jīng)成骨誘導劑誘導后,在脂肪干細胞生長密集區(qū)域內的細胞結構模糊、細胞間界限不清楚。經(jīng)茜素紅染色后,可見較多大小不一的折光率較強顆粒狀結構沉積。掃描電子顯微鏡觀察到脂肪干細胞呈鋪展狀生長于膠原支架材料上。結果表明該方法分離出的脂肪干細胞能在體外擴增并穩(wěn)定傳代,在一定誘導條件下,能夠分化為成骨細胞和脂肪細胞并且與膠原支架具有良好的相容性。
【作者單位】： 吉林大學第四醫(yī)院;吉林大學病理生物學教育部重點實驗室;吉林大學基礎醫(yī)學院病理學系;吉林大學;
【關鍵詞】： 干細胞 脂肪組織 附睪 小鼠 近交BALB C 細胞 培養(yǎng)的 脂肪干細胞 小鼠 差速貼壁 培養(yǎng)
【基金】：吉林省科技發(fā)展計劃青年科研基金資助項目(20090192)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction組織工程學是生物醫(yī)學工程學中的新的分支,是應用生命科學和工程學的原理與技術,設計、構造、改良、培育和保養(yǎng)活組織,以修復或重建組織器官的結構,維持或改善組織器官功能的一門新興的邊緣學科。組織工程學中最主要的研究內容包括:種子細胞、供種子細胞生長

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