發(fā)布時間：2017-08-14 02:02

  本文關(guān)鍵詞：加味龜鹿二仙湯對原發(fā)性卵巢功能不全模型小鼠的干預(yù)作用及其機制研究

  更多相關(guān)文章： 加味龜鹿二仙湯 原發(fā)性卵巢功能不全 小鼠 抗苗勒氏管激素 微小核糖核酸-190基因 脫氫表雄酮

【摘要】：目的:采用環(huán)境化學(xué)物質(zhì)4-乙烯基環(huán)己烯雙環(huán)氧化物(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)構(gòu)建原發(fā)性卵巢功能不全(primary ovarian insufficiency,POI)小鼠模型,觀察加味龜鹿二仙湯對POI模型小鼠動情周期、血清抗苗勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、卵巢組織形態(tài)學(xué)及mi R-190表達(dá)的影響,探討加味龜鹿二仙湯對POI的干預(yù)作用及機制,為臨床上中藥治療POI提供理論依據(jù)。方法:將連續(xù)兩個動情周期正常的40只昆明雌性小鼠納入實驗,隨機分為空白組、模型組、DHEA組、中藥組。對模型組、DHEA組、中藥組連續(xù)15天腹腔注射環(huán)境化學(xué)物質(zhì)VCD構(gòu)建POI模型。其后中藥組給予加味龜鹿二仙湯中藥藥液0.3ml灌胃,DHEA組給予DHEA藥液0.3ml灌胃,而空白組和模型組均給予生理鹽水0.3ml灌胃。4天為一療程,每4天停1天,共30天。灌胃處理完成后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測各組小鼠血清AMH水平,并光鏡下觀察各組小鼠動情周期和卵巢組織形態(tài)學(xué)變化;應(yīng)用實時熒光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)技術(shù)檢測各組小鼠卵巢組織中mi R-190表達(dá)水平。結(jié)果:1.小鼠動情周期改變:空白組小鼠陰道脫落細(xì)胞涂片均有規(guī)律的動情周期;其余三組經(jīng)腹腔注射VCD后均有動情周期紊亂,且以動情間期為主。DHEA組和中藥組經(jīng)藥物干預(yù)治療后,小鼠紊亂的動情周期稍有改善,表現(xiàn)為動情周期延長,動情間期延長。2.小鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)改變:模型組小鼠鏡下見卵巢明顯萎縮,皮質(zhì)增厚,可見較多閉鎖卵泡,原始卵泡及各級發(fā)育中的卵泡消失或偶見。DHEA組和中藥組鏡下見小鼠卵巢原始卵泡及初級卵泡稍增多,閉鎖卵泡減少。3.模型組小鼠血清AMH含量低于空白組,但差異并不顯著;與模型組相比,DHEA組和中藥組小鼠血清AMH含量均有上升趨勢,但差異并不明顯。4.模型組小鼠卵巢mi R-190表達(dá)明顯高于空白組,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與模型組相比,DHEA組和中藥組小鼠卵巢mi R-190表達(dá)量均降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);中藥組小鼠卵巢mi R-190表達(dá)低于DHEA組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),與空白組相比,中藥組小鼠卵巢mi R-190表達(dá)量稍升高,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.運用環(huán)境化學(xué)物質(zhì)VCD可以成功建立POI模型小鼠。2.加味龜鹿二仙湯能有效增加POI模型小鼠卵巢組織原始卵泡和初級卵泡數(shù)量,其機制可能與抑制卵巢mi R-190表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：加味龜鹿二仙湯 原發(fā)性卵巢功能不全 小鼠 抗苗勒氏管激素 微小核糖核酸-190基因 脫氫表雄酮
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料與方法12-22
• 2.1 實驗材料12-14
• 2.1.1 實驗動物12
• 2.1.2 實驗用藥與配制12
• 2.1.3 主要實驗試劑12-13
• 2.1.4 主要儀器13
• 2.1.5 主要試劑的配制13-14
• 2.2 實驗方法14-22
• 2.2.1 實驗分組14
• 2.2.2 POI小鼠模型的建立14-15
• 2.2.3 給藥劑量和方法15
• 2.2.4 標(biāo)本采集15-16
• 2.2.5 實驗步驟16-20
• 2.2.6 統(tǒng)計方法分析20-22
• 第3章 結(jié)果22-28
• 3.1 一般情況22
• 3.2 各組小鼠陰道脫落細(xì)胞檢測結(jié)果22-23
• 3.3 各組小鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)變化23-25
• 3.4 各組小鼠血清中AMH含量的檢測結(jié)果25-27
• 3.5 實時熒光定量PCR檢測小鼠卵巢mi R-190 表達(dá)27-28
• 第4章 討論28-33
• 4.1 POI小鼠模型的建立28-29
• 4.2 AMH與POI29-30
• 4.3 miR-190 的表達(dá)在POI發(fā)病中的機制30-31
• 4.4 加味龜鹿二仙湯治療POI的作用機理31-33
• 第5章 結(jié)論與展望33-34
• 5.1 結(jié)論33
• 5.2 展望33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果39-40
• 綜述40-46
• 參考文獻(xiàn)44-46

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：670135