屬特異性T-RFLP技術(shù)在雙歧桿菌群落分析中的應(yīng)用
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【摘要】:【目的】以雙歧桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株為材料,構(gòu)建雙歧桿菌屬特異性末端限制性片段長度多態(tài)性分析(T-RFLP)技術(shù),用于微生物群落中雙歧桿菌的特異性分析!痉椒ā坎捎16S rRNA基因的雙歧桿菌屬特異性引物,5′-端用HEX熒光標(biāo)記,結(jié)合通用引物1510r進(jìn)行雙歧桿菌特異性PCR擴(kuò)增,軟件模擬酶切后選取Hae III和Alu I進(jìn)行限制性酶切,對酶切消化產(chǎn)物的熒光標(biāo)記末端測序得到T-RFLP峰譜圖。同時將該技術(shù)與實驗室已建立的乳酸桿菌屬特異性T-RFLP技術(shù)相結(jié)合,建立多相T-RFLP技術(shù)應(yīng)用于對市面上益生菌產(chǎn)品的時效性檢測!窘Y(jié)果】建立的方法能夠快速準(zhǔn)確地對不同種的雙歧桿菌及合生元產(chǎn)品中的益生菌進(jìn)行定性或半定量分析!窘Y(jié)論】據(jù)此,成功搭建T-RFLP技術(shù)用于微生態(tài)環(huán)境中雙歧桿菌的檢測,并成功將多相T-RFLP技術(shù)用于市售益生菌產(chǎn)品的時效性檢測。
【作者單位】: 暨南大學(xué)理工學(xué)院食品科學(xué)與工程系;無限極(中國)有限公司;汕頭出入境檢驗檢疫局;
【關(guān)鍵詞】: 雙歧桿菌 T-RFLP技術(shù) 屬特異性引物
【基金】:2012年廣東省自然科學(xué)基金項目(No.S2012010008479) 暨南大學(xué)引進(jìn)優(yōu)秀人才科研啟動基金項目(No.51207053)
【分類號】:R371
【正文快照】: http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn腸道微生物的組成及數(shù)量在人體健康中發(fā)揮著重要的作用,人的腸道健康狀況能夠從腸道乳酸桿菌及雙歧桿菌的數(shù)量和組成中反映出來[1]。雙歧桿菌是嚴(yán)格厭氧的革蘭氏陽性菌,在成人腸道中占3%-7%,在新生兒的腸道中高達(dá)91%[2-3]。雙歧桿菌是益生菌
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【相似文獻(xiàn)】
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1 柳欣源;申劍;王婷婷;李e
本文編號:669779
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