發(fā)布時(shí)間：2017-08-09 22:10

  本文關(guān)鍵詞：Neurexin Ⅱ基因在大鼠及不同胎齡大鼠胚胎腸神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)及意義

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【摘要】：目的：腸神經(jīng)系統(tǒng)(Enteric nervous system, ENS)是由分布于消化道管壁內(nèi)的神經(jīng)元及神經(jīng)纖維組成的內(nèi)在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),接受中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system, CNS)的調(diào)節(jié),但相對(duì)獨(dú)立的調(diào)節(jié)胃腸道的運(yùn)動(dòng)、消化等各項(xiàng)功能。ENS由神經(jīng)嵴細(xì)胞發(fā)育形成,多種基因在其發(fā)育形成過程中發(fā)揮重要作用,如RET基因、SOX10基因、GDNE基因等。腸神經(jīng)元發(fā)育異常性疾病(Neuronal intestinal malformations, NIM)是一類常見且嚴(yán)重危害患兒健康水平的消化道畸形,以消化管壁神經(jīng)分布及功能異常為主要特征,是多種因素影響ENS發(fā)育,最終導(dǎo)致ENS神經(jīng)細(xì)胞在數(shù)量、質(zhì)量、分布及功能上異常的不同結(jié)局,其病因尚未完全闡明。NIM主要包括先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's disease, HD)、腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞發(fā)育不良(Intestinal neuronal dysplasia, IND)、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞減少癥(Hypoganglionosis, HG)、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞未成熟(Immaturity of ganglion cells, IGC)、混合畸形及未分類的腸神經(jīng)發(fā)育不良。研究證實(shí)Neurexins在CNS中廣泛表達(dá),且在功能性突觸的發(fā)生、分化、成熟及維持功能發(fā)面均發(fā)揮重要作用；我們?cè)谇捌谘芯恐邪l(fā)現(xiàn),Neurexins亦在ENS中廣泛表達(dá),與胃腸動(dòng)力紊亂性疾病如HD有密切關(guān)系,Neurexins、其配體Neuroligins及相關(guān)的神經(jīng)介質(zhì)谷氨酸與y-GABA異常是受累腸管蠕動(dòng)功能障礙的重要原因。據(jù)此,實(shí)驗(yàn)通過不同實(shí)驗(yàn)方法對(duì)胎齡16天、18天、20天的大鼠胚胎及出生24小時(shí)內(nèi)的乳鼠(E16組、E18組、E20組、Ep0組)及部分成年大鼠結(jié)腸ENS中Neurexin Ⅱ基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),探討Neurexin Ⅱ基因與ENS發(fā)育的相關(guān)關(guān)系及Neurexin Ⅱ基因與NIM的可能關(guān)系。方法：對(duì)清潔級(jí)健康的Wistar雌性與雄性大鼠進(jìn)行隨機(jī)配組,單獨(dú)交配使雌鼠受孕,受孕后在相同條件下單獨(dú)飼養(yǎng)至相應(yīng)孕齡,麻醉并處死孕齡16、18和20天孕鼠、出生24小時(shí)內(nèi)乳鼠,解剖獲取胚胎第16、18、20天和出生24小時(shí)內(nèi)及部分成年大鼠臨近回盲部、長度1.0cm左右的結(jié)腸全層組織標(biāo)本。對(duì)成年大鼠結(jié)腸標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)DAB染色,觀察Neurexin Ⅱ α蛋白在ENS中的表達(dá)及表達(dá)部位;運(yùn)用免疫組織化學(xué)DAB染色、Western blot及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)胎齡16、18、20天大鼠胚胎和出生24小時(shí)內(nèi)乳鼠結(jié)腸標(biāo)本中Neurexin Ⅱ α蛋白及Neurexin Ⅱ mRNA的表達(dá)。結(jié)果：免疫組織化學(xué)DAB染色結(jié)果顯示Neurexin Ⅱ α蛋白陽性染色成棕黃色或黃褐色,主要表達(dá)于ENS肌間神經(jīng)叢神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,在黏膜下層及黏膜層亦有少量表達(dá)；其達(dá)量隨胚胎發(fā)育自胚胎第16天至出生后第一天逐漸增加。Western blot實(shí)驗(yàn)顯示Neurexin Ⅱ α蛋白在E16、E18、E20和Ep0各組結(jié)腸全層組織提取總蛋白中的相對(duì)含量分別為0.054±0.009、0.106±0.020、0.215±0.013、0.280±0.030,隨胚胎發(fā)育Neurexin Ⅱα蛋白表達(dá)逐漸增加,組間比較與兩兩比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與免疫組化DAB染色結(jié)果所示趨勢(shì)一致。實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在E16、E18、E20和Ep0各組結(jié)腸標(biāo)本中Neurexin Ⅱ mRNA相對(duì)表達(dá)依次為0.390±0.029、0.552±0.054、0.748±0.065、1.000±0.000,與其在蛋白水平的表達(dá)趨勢(shì)一致,組間比較與兩兩比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：Neurexin Ⅱ基因表達(dá)于大鼠ENS中；伴隨胚胎發(fā)育ENS逐漸發(fā)育成熟過程中,其表達(dá)量逐漸增加,同ENS發(fā)育具有時(shí)間相關(guān)性；在ENS發(fā)育過程中,若Neurexin Ⅱ基因功能出現(xiàn)異常可能導(dǎo)致NIM的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：腸神經(jīng)系統(tǒng) NeurexinⅡ 大鼠 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R321
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符號(hào)說明10-11
• 前言11-14
• 實(shí)驗(yàn)材料和方法14-27
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-30
• 討論30-40
• 結(jié)論40-41
• 附表及附圖41-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文53-54
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表54

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2 陳偉強(qiáng);趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測(cè)定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2001年03期

6 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對(duì)Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J];中國血液流變學(xué)雜志;2001年01期

7 韋應(yīng)波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時(shí)間對(duì)大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2003年01期

8 呂學(xué)軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對(duì)大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡易的大鼠保定方法[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2004年01期

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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號(hào)：647531