本文關(guān)鍵詞：脂多糖誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞parkin表達(dá)及線粒體自噬形成

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【摘要】：目的:探討巨噬細(xì)胞在脂多糖(LPS)處理后parkin表達(dá)及對(duì)線粒體自噬的影響。方法:無(wú)菌分離并原代培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞;200 ng/ml LPS作用巨噬細(xì)胞,JC-1標(biāo)記線粒體,流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位變化;RT-PCR檢測(cè)巨噬細(xì)胞parkin mRNA水平;Western blot檢測(cè)parkin及自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表達(dá)水平;激光共聚焦顯微鏡分別檢測(cè)巨噬細(xì)胞在LPS處理前后parkin在細(xì)胞內(nèi)的分布及與LC3和線粒體三者的共定位情況。結(jié)果:JC-1染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,LPS處理后,巨噬細(xì)胞線粒體膜電位降低,并隨LPS作用時(shí)間延長(zhǎng)呈持續(xù)下降趨勢(shì);parkin mRNA在LPS處理6 h內(nèi)僅有少量的增加,但parkin蛋白水平在LPS刺激6 h后增加明顯;parkin在巨噬細(xì)胞定位結(jié)果表明,未受LPS處理時(shí)parkin呈彌散均勻分布,而LPS刺激后parkin呈明顯的點(diǎn)狀聚集;Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示巨噬細(xì)胞在LPS刺激后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例增大,表明巨噬細(xì)胞發(fā)生明顯的自噬;激光共聚焦顯微鏡結(jié)果顯示,巨噬細(xì)胞在LPS刺激后,parkin、LC3和線粒體三者存在共定位關(guān)系。結(jié)論:巨噬細(xì)胞在LPS刺激后,parkin表達(dá)增加并介導(dǎo)線粒體自噬形成,參與對(duì)損傷線粒體的清除,可能在巨噬細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮一定的調(diào)控作用。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院綜合實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細(xì)胞 脂多糖 線粒體自噬 parkin
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30972791)資助
【分類(lèi)號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 革蘭陰性菌感染機(jī)體后,巨噬細(xì)胞通過(guò)其表面膜受體,在其他輔助蛋白的共同作用下識(shí)別革蘭陰性菌細(xì)胞壁成分脂多糖(LPS),引起一系列炎癥因子的釋放,誘發(fā)多種炎癥反應(yīng),以限制清除病原菌。然而過(guò)度的炎癥反應(yīng)則會(huì)造成機(jī)體嚴(yán)重傷害[1,2]。目前認(rèn)為重度炎癥發(fā)生時(shí)伴隨多種組織細(xì)胞的

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：648141