本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對退變髓核細(xì)胞功能的逆轉(zhuǎn)作用

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【摘要】：目的研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)對退變髓核細(xì)胞(dNPCs)的營養(yǎng)修復(fù)作用。方法針刺抽吸法制備SD大鼠退變椎間盤動物模型,分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞(NPCs)及BMSCs,并將BMSCs和dNPCs分別復(fù)合藻酸鹽后等比例接種于transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)上下室中進(jìn)行體外非直接接觸共培養(yǎng)作為實(shí)驗(yàn)組,單純NPCs和dNPCs分別復(fù)合藻酸鹽后作為陽性及陰性對照組。光鏡下觀察細(xì)胞生長情況,選取合適細(xì)胞復(fù)合藻酸鹽在共培養(yǎng)體系中培養(yǎng)7 d后回收各組NPCs,對回收細(xì)胞的CollagenⅠ、Ⅱ和Aggrecan行Western blot及免疫熒光檢測,RT-PCR檢測CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果共培養(yǎng)7 d后,RT-PCR檢測結(jié)果顯示BMSCs+dNPCs組的CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA表達(dá)接近NPCs組,但明顯高于dNPCs組(P均0.05)。Western blot檢測結(jié)果顯示BMSCs+dNPCs組的CollagenⅡ和Aggrecan含量接近甚至超過NPCs組,但明顯高于dNPCs組(P均0.05);CollagenⅠ含量與NPCs組相近,但明顯低于dNPCs組(P0.05)。CollagenⅡ和Aggrecan免疫熒光染色結(jié)果顯示,BMSCs+dNPCs組和dNPCs組胞質(zhì)都被染成紅色,在核周圍著色較深,BMSCs+dNPCs組胞質(zhì)著色范圍及核周圍深染范圍明顯大于dNPCs組。結(jié)論在Transwell非直接接觸共培養(yǎng)條件下,BMSCs能夠促進(jìn)dNPCs外基質(zhì)的表達(dá),提示BMSCs能夠在一定程度上逆轉(zhuǎn)椎間盤dNPCs的功能。
【作者單位】： 江蘇大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院;江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 椎間盤退變 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 髓核細(xì)胞 藻酸鹽 共培養(yǎng)
【基金】：鎮(zhèn)江市科技計劃項(xiàng)目(SH2010031) 鎮(zhèn)江市醫(yī)學(xué)重點(diǎn)人才項(xiàng)目~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 椎間盤是由中央的髓核和周圍的纖維環(huán)組成,其上下椎體接觸面由較薄的透明軟骨終板覆蓋。其中平行排列的膠原纖維組成外層的纖維環(huán)[1],髓核位于纖維環(huán)內(nèi)層,是膠狀組織,髓核細(xì)胞(nucleus pulposuscells,NPCs)是軟骨樣細(xì)胞,其細(xì)胞外基質(zhì)成分主要由蛋白多糖和Ⅱ型膠原組成。蛋白

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本文編號：647332