本文關(guān)鍵詞：中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)生成和降解方法的建立和評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： 中性粒細(xì)胞 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng) 佛波酯

【摘要】：目的中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(NET)是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的與自身免疫性疾病和血栓形成有關(guān)的結(jié)構(gòu),本研究擬建立一種評(píng)價(jià)NET體外生成和降解的方法。方法通過(guò)Ficoll-Histopaque密度梯度離心法從健康人外周血分離中性粒細(xì)胞,利用佛波酯(PMA)誘導(dǎo)其產(chǎn)生NET,免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色和瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證NET的形成,PicoGreen dsDNA染色結(jié)合熒光強(qiáng)度進(jìn)行定量分析,研究DNA酶(DNaseⅠ)和健康人血清對(duì)NET的降解。結(jié)果 Ficoll密度梯度離心法分離的中性粒細(xì)胞純度達(dá)到95%。激光共聚焦顯微成像顯示NET網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)主要由DNA和組蛋白組成,瓊脂糖凝膠電泳顯示NET的DNA條帶大小超過(guò)10 000 bp。DNase和健康人血清均可降解體外誘導(dǎo)的NET,但程度不同。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)成功建立了人NET體外誘導(dǎo)生成和降解的方法。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市心血管重塑與靶器官損傷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 武警后勤學(xué)院附屬平津醫(yī)院心臟中心 心血管病研究所;武警后勤學(xué)院附屬平津醫(yī)院呼吸與重癥醫(yī)學(xué)科;
【關(guān)鍵詞】： 中性粒細(xì)胞 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng) 佛波酯
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81102088,81170238,81070121) 天津市自然科學(xué)基金(12JCYBJC16600,11JCYBJC12000,09ZCZDSF04200)
【分類(lèi)號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 中性粒細(xì)胞是機(jī)體防御病原體入侵的關(guān)鍵細(xì)胞,在固有免疫應(yīng)答系統(tǒng)中起著至關(guān)重要的作用[1]。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為中性粒細(xì)胞主要通過(guò)吞噬和脫顆粒作用抵御病原微生物的入侵[2]。Brinkmann等[3]發(fā)現(xiàn)第3條途徑,一種介于凋亡和壞死的新的細(xì)胞程序性死亡方式-中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(neutrop

【相似文獻(xiàn)】

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