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富血小板血漿對體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞增殖及成骨分化的影響

發(fā)布時間:2017-07-28 22:08

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【摘要】:目的探討不同濃度的富血小板血漿(PRP)對體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)增殖及成骨能力的影響。方法取大鼠骨髓組織,密度梯度離心法體外分離培養(yǎng)BMSCs。取第3代細胞接種,分別加入含0.5%、1%、2%、5%、10%PRP的成骨誘導(dǎo)液或DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng),并以加入不含PRP的成骨誘導(dǎo)液或DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)(0 PRP)的BMSCs作對照。采用XTT比色法測定BMSCs的增殖情況。分別于培養(yǎng)3、7、11 d時用ELISA法測定細胞堿性磷酸酶(ALP)活性,培養(yǎng)7、14、21 d時用放射免疫法檢測骨鈣素(OCN)表達量,培養(yǎng)21 d時用茜素紅染色觀察鈣化結(jié)節(jié)形成能力。結(jié)果成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)的前7 d,PRP可促進BMSCs增殖,成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d以后,PRP也可促進BMSCs的成骨分化,且隨著PRP濃度的增加,促細胞增殖、分化和成骨能力逐漸增強。PRP促進BMSCs內(nèi)ALP活性和OCN表達的作用也呈劑量依賴性。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d后,5%、10%的PRP誘導(dǎo)鈣化結(jié)節(jié)形成能力優(yōu)于0.5%、1%和2%的RPR,0 PRP培養(yǎng)的BMSC僅見少量鈣化結(jié)節(jié)形成。結(jié)論在體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下,RPR能有效促進BMSCs的生長增殖和成骨分化,以濃度10%為最佳。
【作者單位】: 廣東省中山市人民醫(yī)院燒傷整形科;廣東省中山市博愛醫(yī)院整形美容外科;贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨外科;南方醫(yī)科大學(xué)組織工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】富血小板血漿 骨髓間充質(zhì)干細胞 組織工程 細胞增殖 成骨分化
【基金】:2013年度廣東省中山市第二批科技計劃項目(醫(yī)療衛(wèi)生)(編號:20132A086)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 種子細胞、生長因子和生物支架是構(gòu)建骨組織工程的三要素。骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)因具有來源廣泛、擴增迅速、成骨潛能高等優(yōu)點,是骨組織工程中較為理想的種子細胞[1-5]。富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)經(jīng)激活后能釋放出大量

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4 黃珍東;人間充質(zhì)干細胞成骨分化早期HOX家族3’端基因轉(zhuǎn)錄的表觀遺傳調(diào)控[D];東北師范大學(xué);2007年

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10 陳瓊玉;成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Osterix對成骨細胞分化能力調(diào)控作用的研究[D];暨南大學(xué);2006年

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