本文關鍵詞：重組人源化抗DR5單克隆抗體質控方法的建立

  更多相關文章： 人源化抗體 死亡受體 質量控制 生物學活性

【摘要】：目的建立重組人源化抗DR5單克隆抗體的質控方法。方法利用Colo205細胞殺傷試驗測定重組人源化抗DR5單克隆抗體的生物學活性;SDS毛細管凝膠電泳(capillary electrophoresis sodium dodecyl sulfate,CE-SDS)和分子排阻高效液相色譜(size exclusion high performance liquid chromatography,SE-HPLC)分析純度;成像毛細管等點聚焦電泳(imaged capillary isoElectric focusing,iCIEF)法測定等電點及電荷異質性;毛細管區(qū)帶電泳(capillary zone dlectrophoresis,CZE)和肽圖法進行鑒別試驗;切糖后對N-糖進行2-氨基苯甲酰胺(2-amino benzamide,2-AB)標記,采用親水相互作用液相色譜(hydrophilic interaction liquid chromatography,HILIC)柱分離并結合質譜對其糖型進行分析。結果重組人源化抗DR5單克隆抗體生物學活性的EC50值為(9.09±1.03)ng/ml,RSD為11.33%。非還原CE-SDS主峰面積為(90.35±0.19)%,RSD為0.21%;還原CE-SDS重鏈和輕鏈峰面積共為(96.37±0.20)%,RSD為0.21%;SE-HPLC主峰面積為(99.14±0.13)%,RSD為0.13%。iCIEF分析主峰等電點為(8.95±0.00),RSD為0.00%;CZE和肽圖法可對制品做出鑒別。糖譜分析方法相對靈敏。結論建立了重組人源化抗DR5單克隆抗體的質控方法,該方法具有保證產品安全、有效、質量可控的特點,為我國單克隆抗體的質量檢測提供了參考依據。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院單克隆抗體產品室;
【關鍵詞】： 人源化抗體 死亡受體 質量控制 生物學活性
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2014ZX09304311-001)
【分類號】：Q789;R392-33
【正文快照】： 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TNF-relatedapoptosis-induced ligand,TRAIL)有5種受體,分別為死亡受體4(death receptor 4,DR4)、DR5、誘騙受體Ⅰ(decoyreceptorⅠ,DcRⅠ)、DcRⅡ、骨保護素(os-teoprotegerin,OPG),5種受體的同源性較高。天然配體TRAIL與DR5結合后能夠向胞內

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 高昌烈;;單克隆抗體與腫瘤特異性抗原[J];醫(yī)學分子生物學雜志;1980年05期

2 邱萬榮,阮書田,范秉哲;抗人肺癌細胞單克隆抗體的制備及其特性的研究[J];中國生物化學與分子生物學報;1985年01期

3 董志偉,萬文徽,李振甫,邱萬榮,魏淑敏;抗胃癌細胞系單克隆抗體PD4的初步研究[J];中國生物化學與分子生物學報;1985年02期

4 沈建根;馬潔羽;盧偉成;陳宗凡;;分泌抗人A型紅細胞單克隆抗體雜交瘤細胞株的建立[J];浙江大學學報(醫(yī)學版);1985年06期

5 Conen S ,崔晶;單克隆抗體在寄生蟲感染性疾病中的應用[J];微生物學免疫學進展;1986年04期

6 王洪海,劉成貴,張曉平,李力,繆西,張遵一,周惠珍,劉連偉;抗人C-反應性蛋白單克隆抗體的免疫學特性及其臨床應用可行性探討[J];細胞與分子免疫學雜志;1986年03期

7 王棣;;抗大鼠巨噬細胞和多形核白細胞單克隆抗體的制備和應用[J];微生物學雜志;1986年02期

8 WAN JUN II,楊成勇;用單克隆抗體對ts 110-Mo-MSV激活的大白鼠轉化蛋白的鑒定[J];細胞與分子免疫學雜志;1987年01期

9 Y. Shami,喻啟桂;單克隆抗體的產生及其與細胞數和細胞ATP的關系[J];細胞與分子免疫學雜志;1987年02期

10 韓淑華 ,容秉培 ,江敬玨 ,章谷生;抗人IgM重鏈單克隆抗體的特性分析[J];細胞與分子免疫學雜志;1988年01期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 楊天兵;沈倍奮;;抗人重組白細胞介素1(rHIL-1)單克隆抗體的研制[A];中國細胞生物學學會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

2 馬記萱;高遠;邁迪娜;呂兆啟;;抗羊LDH-X單克隆抗體的制備及其特性研究[A];中國細胞生物學學會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

3 侯淑萍;劉原君;馬t焥，

本文編號：578709