人β防御素-2穩(wěn)定表達細胞株的建立及其表達產(chǎn)物對耐藥大腸埃希菌抗菌活性研究
本文關鍵詞:人β防御素-2穩(wěn)定表達細胞株的建立及其表達產(chǎn)物對耐藥大腸埃希菌抗菌活性研究
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【摘要】:目的建立穩(wěn)定表達人β防御素2(hBD2)的COS-7細胞株,并檢測其表達產(chǎn)物對耐藥大腸埃希菌的抗菌活性。方法將重組hBD2真核表達載體pCMV-hBD2通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染COS-7細胞,篩選穩(wěn)定表達hBD2單克隆細胞株;經(jīng)RT-PCR和Western blot檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后目的基因在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平的表達;用微量稀釋法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后細胞培養(yǎng)上清液對耐藥大腸埃希菌的抗菌作用。結果篩選出穩(wěn)定表達hBD2的COS-7細胞株,檢測到目的基因在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平均有表達,且其表達產(chǎn)物使耐藥大腸埃希菌存活率降至15%。結論建立了穩(wěn)定表達hBD2的COS-7細胞株,其表達產(chǎn)物對耐藥大腸埃希菌具有一定的抗菌活性。
【作者單位】: 蘭州大學基礎醫(yī)學院病理生理研究所;
【關鍵詞】: 人β防御素- 穩(wěn)定表達 耐藥大腸埃希菌 抗菌活性
【基金】:中央高;究蒲袠I(yè)務費專項資金(lzujbky-2012-188)
【分類號】:R3416
【正文快照】: 防御素是一類富含精氨酸的內(nèi)源性陽離子抗微生物肽,根據(jù)防御素分子內(nèi)半胱氨酸所構成的3個二硫鍵的位置不同,可將防御素分為α、β、θ3種[1-3]。人β防御素(human beta-defensins,hBDs)廣泛表達于黏膜上皮細胞的一種內(nèi)源性抗生素肽,不僅有廣譜高效的抗微生物作用,還參與機體免
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